基础研究
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世界华人消化杂志. 2020-10-28; 28(20): 1009-1015
Published online 2020-10-28. doi: 10.11569/wcjd.v28.i20.1009
内质网应激-自噬肝癌SMMC-7721细胞模型的复制及金刚藤的干预
凌江红, 文一惠, 周芬敏, 陈珺明, 郭锦荣
凌江红, 周芬敏, 陈珺明, 郭锦荣, 上海健康医学院附属周浦医院中医科 上海市 200021
凌江红, 上海中医药大学附属曙光医院消化科 上海市 200021
凌江红, 博士, 教授, 主要从事中医药防治消化系统疾病诊治研究.
文一惠, 广西医科大学第一附属医院中医科 广西壮族自治区南宁市 530021
基金项目: 上海市浦东新区卫生系统重点学科建设项目, No. PWZxk2017-02; 国家自然科学基金资助项目, No. 81973774.
作者贡献分布: 凌江红与文一惠对此文所作贡献均等; 此课题由凌江红、周芬敏、陈珺明及郭锦荣设计; 研究过程由凌江红、文一惠、周芬敏、陈珺明及郭锦荣操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由凌江红提供; 数据分析由文一惠完成; 本论文写作由凌江红与文一惠完成.
通讯作者: 凌江红, 博士, 教授, 200021, 上海市浦东新区周园路1500号, 上海健康医学院附属周浦医院中医科. 459183870@qq.com
收稿日期: 2020-07-20
修回日期: 2020-08-18
接受日期: 2020-09-21
在线出版日期: 2020-10-28
文章亮点
实验背景

肝癌是常见的消化道恶性肿瘤, 死亡率位居世界第2位. 金刚藤具有抑制肝癌细胞的作用, 而内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)-自噬的保护作用能够促进肝癌细胞生存, 因而探寻肝癌细胞ERS-自噬对金刚藤抑制肝癌细胞作用的影响具有重要意义.

实验动机

临床治疗肝癌主要采用手术及化疗的方法, 但大部分确诊患者已失去手术机会, 而化疗存在副作用大且易产生耐药性. 中医药治疗肝癌具有疗效稳定且副作用小的特点, 因而探寻金刚藤抗肝癌细胞的深层机制对于其临床运用及新的研究方向具有重要指导意义.

实验目标

探讨二硫苏糖醇(Dithiothreitol, DTT)诱导SMMC-7721细胞ERS-自噬及金刚藤的干预。

实验方法

ERS-自噬模型的复制: DTT处理SMMC-7721细胞, 采用透射电镜观察自噬小体和Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅱ, LC3-Ⅱ)蛋白的表达. 金刚藤的干预: 运用金刚藤干预ERS-自噬肝癌SMMC-7721细胞模型, 采用CCK-8法检测细胞的存活率.

实验结果

DTT能够诱导肝癌SMMC-7721细胞ERS-自噬; DTT诱导肝癌SMMC-7721细胞的ERS-自噬可抵抗金刚藤抑制SMMC-7721细胞的存活率.

实验结论

DTT可诱导肝癌SMMC-7721细胞ERS-自噬, 且DTT诱导肝癌细胞的ERS-自噬可抵抗金刚藤抑制SMMC-7721细胞的存活率.

展望前景

抑制ERS-自噬在化疗药物耐药方面可能具有潜在的应用价值.