基础研究
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世界华人消化杂志. 2019-08-08; 27(15): 918-926
Published online 2019-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v27.i15.918
miR-216a-5p调控XIAP对急性胰腺炎腺泡细胞增殖、凋亡的影响
丁谦谦, 楼定进, 王海英
丁谦谦, 义乌市中心医院急诊科 浙江省义乌市 322000
丁谦谦, 本科, 主治医师, 研究方向为急诊治疗.
楼定进, 义乌市中心医院全科医学 浙江省义乌市 322000
王海英, 义乌市中心医院消化内科 浙江省义乌市 322000
作者贡献分布: 丁谦谦与王海英对此文所作贡献两均等; 此课题由丁谦谦与王海英设计; 研究过程由丁谦谦、楼定进与王海英操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由楼定进提供; 数据分析由丁谦谦、楼定进完成; 本论文写作由丁谦谦、楼定进与王海英完成.
通讯作者: 丁谦谦, 主治医师, 322000, 浙江省义乌市北苑街道四季一区21栋1单元501, 义乌市中心医院急诊科. hedw0022605hexi@163.com
电话: 0579-85209666
收稿日期: 2019-04-29
修回日期: 2019-05-29
接受日期: 2019-07-26
在线出版日期: 2019-08-08
文章亮点
实验背景

急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)的发病机制复杂, 并发症较多, 对人生命健康危害加大. 根据其严重程度的不同, 可分为轻型急性胰腺炎(mild acute pancreatitis, MAP)和重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP). MAP较容易治愈, 但SAP因为早期病情隐匿, 后期发展快, 发现时已很严重, 所以死亡率较高. 早诊断、早发现、早治疗是对SAP具有重要意义. AP主要病因有胆源性, 高脂血症性, 酒精性, 暴饮暴食性等. 早期主要采用非手术个体化治疗, 包括液体复苏、抗生素的使用、早期肠内营养、特效药物和我国的传统医学治疗等. 更为精准高效的治疗需要清楚其进展机制, 研究miRNA可以作为AP的生物标志物, 预测并且判定AP的发生、发展、并发症发生等, 还可以调控AP的程序性细胞死亡, 并且可以作为AP的治疗靶点. 而本文主要是从miRNA方面研究其对AP凋亡的影响及其可能的作用机制.

实验动机

本研究的主题是miR-216a-5p对AP增殖凋亡的影响, 拟解决的关键问题是了解miR-216a-5p是如何影响AP细胞的增殖和凋亡, 以及其和XIAP之间的关系及它们对AP的影响, 在AP中的发生发展机制, 为以后临床上的诊断治疗等提供新思路和新靶点.

实验目标

研究的主要目标即miR-216a-5p, XIAP, AP之间的关系, 研究得到miR-216a-5p和XIAP均在AP中异常表达, 抑制miR-216a-5p表达和过表达XIAP均可抑制雨蛙素(caerulein, CAE)处理AR42J细胞凋亡, 且miR-216a-5p靶向负调控XIAP. 可以从调控AP凋亡的途径来调控其进展, 为其治疗提供新思路.

实验方法

本研究首先是用CAE处理大鼠胰腺腺泡来构建AP的模型. 转染miR-216a-5p抑制表达和XIAP过表达的载体质粒, MTT检测细胞增殖活性, 流式细胞术检测细胞凋亡, Western blot检测XIAP蛋白表达, qRT-PCR检测miR-216a-5p和XIAP mRNA表达水平, 荧光素酶报告基因检测实验检测miR-216a-5p与XIAP之间的靶向关系.

实验结果

本实验的结果是在CAE构建的AP模型细胞中, miR-216a-5p的表达水平升高. 抑制miR-216a-5p表达、过表达XIAP腺泡细胞凋亡率降低. miR-216a-5p靶向负调控XIAP, 抑制XIAP表达逆转了抑制miR-216a-5p对CAE处理AR42J细胞的凋亡抑制作用; 达到了本实验的目的, 对该领域AP的发病进展机制又增加了相关的理论依据, 以后可以进一步在临床方面进行研究应用.

实验结论

miR-216a-5p靶向负调控XIAP; 抑制miR-216a-5p表达、过表达XIAP抑制腺泡细胞凋亡. 可以通过调控XIAP影响AP的进展. 从miRNA角度去研究其对AP的影响拓宽了研究的范围, 更多的miRNA影响AP的进展, 增加了可治疗的靶点. 不同的miRNA在AP中的表达不同, 可通过研究不同的miRNA及其不同的靶基因影响AP的进展进而拓展研究思路. miR-216a-5p可以调控XIAP影响腺泡细胞凋亡. 通过上调或下调miRNA可以影响AP的细胞的凋亡及其严重程度. 对未来临床实践提供了新的靶点和思路.

展望前景

只是在理论层面上对小鼠模型的研究, 到临床上的研究和应用还相差甚远. 进一步深入的研究调控miR-216a-5p和XIAP对治疗AP小鼠的影响及其可能会产生的现象以及进一步往临床方向进行相关研究. 寻找更接近于真实AP的小鼠或者与人AP更为相似的受体, 再次基础上进行治疗, 同时观察其后期的反应和状况.