基础研究
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世界华人消化杂志. 2019-08-08; 27(15): 918-926
Published online 2019-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v27.i15.918
miR-216a-5p调控XIAP对急性胰腺炎腺泡细胞增殖、凋亡的影响
丁谦谦, 楼定进, 王海英
丁谦谦, 义乌市中心医院急诊科 浙江省义乌市 322000
丁谦谦, 本科, 主治医师, 研究方向为急诊治疗.
楼定进, 义乌市中心医院全科医学 浙江省义乌市 322000
王海英, 义乌市中心医院消化内科 浙江省义乌市 322000
作者贡献分布: 丁谦谦与王海英对此文所作贡献两均等; 此课题由丁谦谦与王海英设计; 研究过程由丁谦谦、楼定进与王海英操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由楼定进提供; 数据分析由丁谦谦、楼定进完成; 本论文写作由丁谦谦、楼定进与王海英完成.
通讯作者: 丁谦谦, 主治医师, 322000, 浙江省义乌市北苑街道四季一区21栋1单元501, 义乌市中心医院急诊科. hedw0022605hexi@163.com
电话: 0579-85209666
收稿日期: 2019-04-29
修回日期: 2019-05-29
接受日期: 2019-07-26
在线出版日期: 2019-08-08
Abstract
背景

重症急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)是消化系统常见的危重急症, 临床救治难度大, 病死率高, 严重危及患者生命. 近几年来多种miRNA在AP中的差异表达, 与其发生发展及诊断和预后密切相关, 进一步探索其在AP发生发展、并发症等各环节的作用有助于为AP的诊断和治疗提供新的思路和方法. 研究发现miR-216a-5p通过下调MMP16可抑制肺癌细胞的侵袭; miR-216a-5p通过靶向抑制PAK2基因可抑制膀胱癌细胞的增殖能力, 促进细胞凋亡. miR-216a-5p可抑制小细胞肺癌的恶性进展, 影响前列腺癌细胞的增殖、迁移和宫颈癌细胞的肿瘤发生. 仅发现miR-216a在AP患者外周血中高表达, 但miR-216a-5p在AP的增殖凋亡中的影响及作用机制尚不清楚.

目的

研究miR-216a-5p对AP腺泡细胞增殖、凋亡的影响及潜在的作用机制.

方法

用雨蛙素(caerulein, CAE)处理大鼠胰腺腺泡AR42J构建AP模型, 设置miR-NC组(转染miR-NC)、miR-216a-5p组(miR-216a-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-216a-5p组(转染anti-miR-216a-5p)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1)、pcDNA3.1-XIAP组(转染pcDNA3.1-XIAP)、anti-miR-216a-5p+si-NC组(共转染anti-miR-216a-5p和si-NC)、anti-miR-216a-5p+si-XIAP(共转染anti-miR-216a-5p和si-XIAP)组, 均用脂质体法转染. qRT-PCR检测AR42J细胞中miR-216a-5p的表达水平; Western Blot检测蛋白表达; MTT法检测细胞活性; 流式细胞术检测细胞凋亡; 双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性.

结果

CAE处理AR42J细胞后, miR-216a-5p的表达水平显著升高(P<0.05). 抑制表达miR-216a-5p和过表达XIAP细胞活性显著升高, 细胞凋亡率显著降低, Cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达水平显著升高, P21、Bax蛋白的表达水平显著下降(P<0.05). miR-216a-5p靶向负调控XIAP; 抑制XIAP表达逆转了抑制miR-216a-5p对CAE处理的AR42J细胞增殖促进、凋亡抑制的作用.

结论

抑制miR-216a-5p表达可以抑制胰腺炎腺泡细胞凋亡, 促进细胞增殖, 其机制可能与靶向调控XIAP有关. 可为AP诊断和治疗提供新靶点和新思路.

Keywords: miR-216a-5p; XIAP; 急性胰腺炎; 增殖; 凋亡

核心提要: miR-216a-5p在急性胰腺炎模型细胞中高表达, miR-216a-5p靶向负调控XIAP, 抑制miR-216a-5p表达可以通过上调XIAP的表达抑制胰腺炎腺泡细胞凋亡, 促进细胞增殖.