研究快报
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世界华人消化杂志. 2014-07-18; 22(20): 2881-2886
Published online 2014-07-18. doi: 10.11569/wcjd.v22.i20.2881
c-Jun氨基末端激酶抑制剂对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的防治及机制
王珣, 鲁新耀, 张鹏, 王明林, 于红刚, 胡义奎
王珣, 鲁新耀, 张鹏, 王明林, 武汉市武昌医院消化内科 湖北省武汉市 430063
于红刚, 武汉大学人民医院消化内科 湖北省武汉市 430060
胡义奎, 华中科技大学同济医学院附属普爱医院神经内科 湖北省武汉市 430034
王珣, 主治医师, 主要从事消化系疾病发病机制的研究.
基金项目: 武汉市卫生局科研基金资助项目, No. WX1321.
作者贡献分布: 此课题由王珣、鲁新耀及张鹏设计; 动物模型制作与基因、蛋白检测分析由王明林与于红刚操作完成; 统计学分析由胡义奎完成; 论文写作由王珣完成.
通讯作者: 胡义奎, 主治医师, 430034, 湖北省武汉市硚口区解放大道50号, 华中科技大学同济医学院附属普爱医院神经内科. 1274965507@qq.com
收稿日期: 2014-03-28
修回日期: 2014-05-10
接受日期: 2014-05-29
在线出版日期: 2014-07-18
Abstract

目的: 探讨选择性c-Jun氨基末端激酶(Jun N-terminal kinase, JNK)抑制剂SP600125对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis, NASH)的保护作用及机制.

方法: 48只♂SD大鼠随机分为正常对照组(NC, 18只)、模型组(HF组, 15只)和SP600125干预组(SP干预组, 15只). HF组及SP干预组大鼠高脂饮食12 wk, 建立高脂诱导的NASH模型, 12 wk时分别处死NC组大鼠6只, HF组及SP干预组各3只, 用于NASH模型病理学鉴定. 最终NC组、HF组及SP干预组大鼠数目均为12只. HF组及SP干预组大鼠建立经皮肠系膜上静脉给药途径, HF组给予二甲基亚砜, SP干预组给予SP600125(50 mg/kg), 1次/d, 连续4 wk. 第16周处死全部大鼠, 采用ELISA法测定匀浆液的肿瘤坏死因子α、白介素-6含量; HE染色观察肝组织普通病理变化. Masson染色观察肝组织纤维化程度. 苏丹Ⅳ染色观察肝组织脂肪变的程度. 采用RT-PCR方法检测JNK mRNA. 采用免疫印迹(Western blot)法检测c-Jun蛋白和磷酸化蛋白水平.

结果: 高脂饮食16 wk后, SD大鼠肝组织呈弥漫性脂肪变性, 炎性细胞浸润及小叶内坏死灶增多, 可见明显的窦周纤维化及中央静脉周围纤维化. SP干预组大鼠肝组织炎性反应、脂肪变性及纤维化程度均较模型对照组改善, 差异具有统计学意义; RT-PCR结果显示: 正常大鼠肝脏组织内JNK mRNA表达量少, HF组表达量增加, 差异具有统计学意义. 而SP干预组较模型JNK mRNA表达量减少, 差异具有统计学意义. Western blot结果显示: HF组较NC组大鼠肝组织中c-Jun蛋白及p-c-Jun升高, 差异具有统计学意义. 而SP干预组c-Jun蛋白及p-c-Jun较HF组明显减少, 差异具有统计学显著性意义.

结论: SP600125可能通过抑制JNK通路阻止NASH发生, 有望成为治疗NASH的新型药物.

Keywords: 非酒精性脂肪性肝炎; c-Jun氨基末端激酶

核心提示: 非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis, NASH)以胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)和炎症反应为特征. c-Jun氨基末端激酶(Jun N-terminal kinase, JNK)信号转导通路参与到NASH发病机制中IR和炎症反应这两个关键环节, 因此抑制JNK的活性有可能成为治疗NASH的有效方法. 本研究采用新型JNK抑制剂-SP600125, 建立肠系膜上静脉置管给药通路, 采用饮食诱导NASH大鼠动物模型, 初步探讨JNK抑制剂防治NASH的作用, 为新药研究奠定实验基础.