长链非编码RNA ASB16-AS1调控miR-670-3p/ATXN7L3轴影响胃癌细胞增殖、迁移和侵袭

表1 胃癌细胞系中lncRNA ASB16-AS1 、ATXN7L3和miR-670-3p 表达量(mean±SD, n = 9)

组别	LncRNA ASB16-AS1	miR-670-3p	ATXN7L3 mRNA	ATXN7L3 protein
GES-1	1.00±0.11	1.02±0.12	1.03±0.14	0.42±0.04
HGC-27	3.59±0.30b	0.38±0.03b	2.79±0.24b	0.97±0.09b
AGS	3.05±0.28b	0.45±0.04b	2.37±0.22b	0.86±0.07b
NUGC-4	2.38±0.21b	0.52±0.05b	1.89±0.16b	0.76±0.06b
F	200.618	156.789	135.905	111.742
P值	0.000	0.000	0.000	0.000

^bP<0.01, 与人胃黏膜细胞GES-1比较.

表2 抑制lncRNA ASB16-AS1表达对胃癌细胞HGC-27增殖、迁移和侵袭的影响(mean±SD, n = 9)

组别	LncRNA ASB16-AS1	CyclinD1	MMP2	MMP9	OD450 nm	细胞迁移数量	细胞侵袭数量
si-NC	1.00±0.12	1.02±0.10	0.83±0.08	0.76±0.07	0.813±0.10	181.27±18.27	141.05±14.11
si-ASB16-AS1	0.44±0.04b	0.42±0.04b	0.37±0.03b	0.32±0.04b	0.402±0.08b	86.39±8.07b	66.49±6.52b
t	13.282	16.713	16.152	16.373	9.628	14.251	14.391
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

^bP<0.01, 与si-NC比较.

表3 过表达miR-670-3p对胃癌细胞HGC-27增殖、迁移和侵袭的影响(mean±SD, n = 9)

组别	miR-670-3p	CyclinD1	MMP2	MMP9	OD450 nm	细胞迁移数量	细胞侵袭数量
miR-NC	1.00±0.11	1.02±0.10	0.85±0.08	0.74±0.07	0.821±0.09	178.11±17.24	138.27±13.42
miR-670-3p	2.67±0.22b	0.48±0.05b	0.40±0.03b	0.35±0.04b	0.457±0.05b	96.08±9.13b	72.13±7.08b
t	-20.369	14.490	15.801	14.512	10.606	12.615	13.077
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

^bP<0.01, 与miR-NC比较.

表4 抑制ATXN7L3表达对胃癌细胞HGC-27增殖、迁移和侵袭的影响(mean±SD, n = 9)

组别	ATXN7L3	CyclinD1	MMP2	MMP9	OD450 nm	细胞迁移数量	细胞侵袭数量
si-NC	0.95±0.10	0.98±0.09	0.85±0.08	0.72±0.07	0.815±0.10	185.11±15.22	146.78±14.07
si-ATXN7L3	0.40±0.03b	0.43±0.04b	0.37±0.03b	0.42±0.04b	0.395±0.08b	86.26±8.35b	80.88±7.02b
t	15.804	16.753	16.854	11.163	9.839	17.082	12.573
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

^bP<0.01, 与si-NC比较.

表5 miR-NC或miR-670-3p与ASB16-AS1野生型及突变型报告质粒共转染HGC-27细胞后双荧光素酶活性检测(mean±SD, n = 9)

组别	荧光素酶活性
	WT-ASB16-AS1	MUT-ASB16-AS1
miR-NC	1.00±0.12	1.04±0.13
miR-670-3p	0.45±0.04b	1.01±0.11
t	13.044	0.528
P值	0.000	0.604

^bP<0.01, 与miR-NC比较.

表6 实时荧光定量PCR检测miR-670-3p 的表达(mean±SD, n = 9)

组别	miR-670-3p
pcDNA-NC	1.00±0.14
pcDNA-ASB16-AS1	0.48±0.05b
si-NC	1.02±0.10
si-ASB16-AS1	1.42±0.15d
F	97.934
P值	0.000

^bP<0.01, 与pcDNA-NC比较;

^dP<0.01, 与si-NC比较.

表7 miR-NC或miR-670-3p与ATXN7L3-3'UTR野生型及突变型报告质粒共转染HGC-27细胞后双荧光素酶活性检测(mean±SD, n = 9)

组别	荧光素酶活性
	WT-ATXN7L3	MUT-ATXN7L3
miR-NC	1.00±0.13	1.02±0.10
miR-670-3p	0.44±0.04b	0.97±0.08
t	12.352	1.171
P值	0.000	0.259

^bP<0.01, 与miR-NC比较.

表8 Western Blot检测ATXN7L3蛋白表达(mean±SD, n = 9)

组别	ATXN7L3
miR-NC	0.94±0.10
miR-670-3p	0.42±0.04b
anti-miR-NC	0.96±0.07
anti-miR-670-3p	1.35±0.14d
F	145.222
P值	0.000

^bP<0.01, 与miR-NC比较,

^dP<0.01; 与anti-miR-NC比较.

表9 下调miR-670-3p 能够逆转ASB16-AS1低表达对HGC-27细胞增殖、迁移和侵袭的影响(mean±SD, n = 9)

组别	miR-670-3p	CyclinD1	MMP2	MMP9	OD450 nm	细胞迁移数量	细胞侵袭数量
si-ASB16-AS1+anti-miR-NC	1.00±0.08	0.40±0.04	0.35±0.03	0.30±0.04	0.397±0.05	82.04±8.22	62.11±6.05
si-ASB16-AS1+anti-miR-670-3p	0.46±0.04b	0.90±0.10b	0.73±0.06b	0.65±0.07b	0.689±0.07b	162.43±16.07b	123.59±12.08b
t	18.112	13.927	16.994	13.024	10.079	13.361	-13.652
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

^bP<0.01, 与si-ASB16-AS1+anti-miR-NC比较.

表10 过表达ATXN7L3能够逆转抑制ASB16-AS1对HGC-27细胞增殖、迁移和侵袭的影响(mean±SD, n = 9)

组别	ATXN7L3	CyclinD1	MMP2	MMP9	OD450 nm	细胞迁移数量	细胞侵袭数量
si-ASB16-AS1+pcDNA-NC	0.46±0.04	0.39±0.03	0.33±0.04	0.31±0.02	0.406±0.08	80.77±8.05	65.81±6.08
si-ASB16-AS1+pcDNA-ATXN7L3	0.82±0.08b	0.80±0.08b	0.70±0.07b	0.62±0.06b	0.734±0.09b	151.36±15.10b	117.24±11.22b
t	12.075	14.396	13.768	14.705	8.172	12.376	12.090
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

^bP<0.01, 与si-ASB16-AS1+anti-miR-NC比较.