基础研究
Copyright ©The Author(s) 2012.
世界华人消化杂志. 2012-11-08; 20(31): 3000-3004
在线出版 2012-11-08. doi: 10.11569/wcjd.v20.i31.3000
表1 引物序列, 扩增片段及反应条件
引物引物序列扩增片段长度(bp)反应条件
GAPDH正义链ACC ACA GTC CAT GCC ATC AC46094 ℃ 1 min后, 98 ℃ 10 s; 53 ℃ 2 s; 74 ℃ 30 s, 共30循环, 74 ℃延伸10 min
反义链TCC ACC ACC CTG TTG CTG TA
MIF正义链CCA TGC CTA TGT TCA TCG TG25094 ℃ 1 min后, 98 ℃ 10 s; 51℃ 2 s; 74 ℃ 30 s, 共30循环, 74 ℃延伸10 min
反义链AGG CCA CAC AGC AGC TTA CT
CD74正义链CCA CTG GAC ATG GAA GAC CT23194 ℃ 1 min后, 98 ℃ 10 s; 52 ℃ 2 s; 74 ℃ 30 s, 共30循环, 74 ℃延伸10 min
反义链GAC TTC ATT TGC CGT GTC CT
tiam1正义链CTA CCG AAG CTT TGC AGG TC28094 ℃ 1 min后, 98 ℃ 10 s; 51 ℃ 2 s; 74 ℃ 30 s, 共30循环, 74 ℃延伸10 min
反义链TCC GTT TTG AGG AGC TGT CT
E-Cadherin正义链CAA GGA CAG CCT TCT TTT CG16594 ℃ 1 min后, 98 ℃ 10 s; 51 ℃ 2 s; 74 ℃ 30 s, 共30循环, 74 ℃延伸10 min
反义链TGG ACT TCA GCG TCA CTT TG
表2 MIF siRNA处理大肠癌CT-26细胞后MIF、CD74、tiam1与E-Cadherin的mRNA表达
分组MIFCD74tiam1E-Cadherin
MIF siRNA0.89±0.03b0.88±0.08b0.89±0.09b0.8±0.22b
非特异性的siRNA1.11±0.131.08±0.071.18±0.241.63±0.20
空白组1.2±0.11.09±0.081.16±0.131.62±0.24
表3 MIF siRNA处理大肠癌CT-26细胞后细胞内MIF与CD74蛋白的表达
分组MIFCD74
MIF siRNA1913.83±114.06b2312.67±396.09d
非特异性的siRNA2226.67±84.322800.33±187.41
空白组2170.33±118.242727.83±266.11

引文著录: 徐慧鲜, 马伟钦, 杨荣娇, 王亚敏, 王丽京, 臧林泉, 何兴祥. 靶向MIF的siRNA对大肠癌细胞侵袭的影响. 世界华人消化杂志 2012; 20(31): 3000-3004