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世界华人消化杂志. 2012-11-08; 20(31): 3000-3004
Published online 2012-11-08. doi: 10.11569/wcjd.v20.i31.3000
Published online 2012-11-08. doi: 10.11569/wcjd.v20.i31.3000
靶向MIF的siRNA对大肠癌细胞侵袭的影响
徐慧鲜, 马伟钦, 杨荣娇, 王亚敏, 何兴祥, 广东药学院附属第一医院消化内科 广东省广州市 510080
王丽京, 广东药学院基础学院 广东省广州市 510006
臧林泉, 广东药学院药科学院 广东省广州市 510006
徐慧鲜, 硕士, 主要从事大肠癌的研究.
基金项目: 广东省科学技术厅科技计划基金资助项目, No. 2008A030201001; 广东省自然科学基金资助项目, No. 9251065005000001; 广东省高等学校高层次人才基金资助项目, No.粤教师函[2010]79号; 国家自然科学基金青年科学基金资助项目, No. 61201437.
作者贡献分布: 何兴祥设计课题; 臧林泉与王丽京提供实验室及部分研究材料; 徐慧鲜、马伟钦、杨荣娇及王亚敏参与实验操作.
通讯作者: 何兴祥, 教授, 510080, 广东省广州市农林下路19号, 广东药学院附属第一医院消化内科. xingxianghe@medmail.com.cn
收稿日期: 2012-06-28
修回日期: 2012-10-10
接受日期: 2012-10-29
在线出版日期: 2012-11-08
修回日期: 2012-10-10
接受日期: 2012-10-29
在线出版日期: 2012-11-08
Abstract
目的: 研究化学合成的siRNA干扰巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration-inhibitory factor, MIF)后, 对大肠癌CT-26细胞侵袭的影响并探讨其可能的机制.
方法: 实验组用靶向MIF的siRNA处理CT-26细胞, 对照组用非特异性的siRNA处理CT-26细胞, 空白组不添加任何干扰剂. Transwell细胞侵袭试验检测细胞侵袭情况, ELISA检测培养上清中MIF蛋白的含量, 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MIF、CD74、T淋巴瘤侵袭转移因子1(tiam1)、E-Cadherin mRNA的表达, Western blot检测细胞内MIF及CD74蛋白表达.
结果: 实验组经化学合成的MIF siRNA处理大肠癌CT-26细胞24 h后, 与对照组和空白组相比, 其侵袭受到明显抑制(P = 0.012); 实验组培养上清中MIF蛋白的含量与对照组和空白组比较有显著下降(P = 0.02); 实验组中MIF、CD74、tiam1的mRNA的表达较对照组和空白组相比显著下降(PMIF = 0.001; PCD74 = 0.001; Ptiam1 = 0.004); 实验组中E-Cadherin的表达较对照组和空白组升高(PE-Cadherin = 0.001); 实验组细胞内的MIF及CD74蛋白较对照组和空白组表达明显下降(PMIF = 0.006; PCD74 = 0.016).
结论: 化学合成的MIF siRNA抑制了CT-26细胞的侵袭, 其可能机制是靶向MIF的siRNA抑制了MIF的表达, 降低了CD74与tiam1的表达, 升高了E-Cadherin的表达.
Keywords: 巨噬细胞移动抑制因子; siRNA; 大肠癌