人突变型CDK4真核荧光表达质粒的构建及对人肝细胞SMMC-7702中POLD1基因表达的调控

表1 PCR引物序列表

基因名称	引物序列(5'-3')		产物长度(bp)
CDK4(全长)	上游 GGAATTCGAATGGCTACCTCTCGATATGA	下游 ACGCGTCGACGCCCTCTCAGTGTCCAG	977
CDK4(荧光定量)	上游 GTTCGTGAGGTGGCTTTACTG	下游 GTCCTTAGGTCCTGGTCTACATG	145
POLD1(荧光定量)	上游 GCTCCGCTCCTACACGCTCAA	下游 GGTCTGGTCGTTCCCATTCTGC	109
β-actin(荧光定量)	上游 AACTCCATCATGAAGTGTGA	下游 ACTCCTGCTTGCTGATCCAC	247

表2 突变型CDK4碱基突变位点, 导致氨基酸的改变以及突变意义

突变位点	原碱基	突变后碱基	氨基酸变化
470	G_A	GGA	-
516	C_T	CCT	-
522	TCG	TGG	Ser→Try
524	GAA	GA_缺失	-
583	CCT	C_T缺失	-
605	GCT	GCA	Ala→Glu
606	_TT	CTT	-
610	TTT	TAT	Phe→Tyr
620	ATG	AAG	Met→Lys
622	_AT	GAT	-
633	AAC	AAT	Asp→Asp