基于生物信息学的植物乳酸杆菌表层黏附蛋白的筛选及鉴定

表1 PCR中各蛋白及片段所用引物

基因名称	上游引物	下游引物
PO	atcagatctgATGGCAAAGATGATTGAAGC	atcctcgagCTATTCGACGTTGAACTCCT
GB	atcagatctgTTGAAATTTAGAGATGATAT	atcctcgagTTACTTGTTCATTTTACGCT
CD	atcagatctgGTGGGTGTGATGGCCATTTT	atcctcgagTCAATTATTCTGATTCTTGA
LC	atcagatctgGTGCTAGCATGCCTACTGTG	atcctcgagTTAACGTGCTAGCGTTAGCC
IMP1	atcagatctgTTGAAGACAGTACGGAAGAT	atcctcgagAATCGCAGCAAGATCAACGC
IMP2	atcagatctgAATACTAATTCTAATAGTAC	atcctcgagAAGATAGAGTTCCGTATTTC
IMP3	atcagatctgAAGCCAACCGTTACCGGAAA	atcctcgagTTTTAGTCCTGGTGTGTGAT

表2 表达蛋白

编号	蛋白名称	PI	GenBank登录号	表达途径
No.1	丙酮酸氧化酶	5.0	ABC47131.1	全长
No.2	细胞分裂激活蛋白	10.32	NP_785691.1	全长
No.3	A型GTP-结合蛋白	5.12	NP_785653.1	全长
No.4	后期能力蛋白	9.84	NP_784489.1	全长
No.5	整合膜蛋白	10.02	NP_785773.1	3段

表3 间接法ELISA检测兔抗IM2多克隆抗体效价

名称	阴性血清	空白对照	IM2抗体	IM2抗体	IM2抗体	IM2抗体	IM2抗体	IM2抗体
抗体稀释度	1/1000	1/1000	1/16000	1/64000	1/256000	1/512000	1/1024000	1/2048000
A值	0.023	0.021	2.772	2.635	2.580	2.218	1.799	1.186