主动外排泵外膜蛋白编码基因hefA在幽门螺杆菌多重耐药中的重要作用

表1 PCR引物列表

引物名称	序列	扩增大小(bp)
hefA	F: 5'-ACGCCTCGAGTAAAAGCGCAAGGGAATTTG-3'	142
	R: 5'-ACGCTCTAGATTCGCTAATTGGCCTAGCAT-3'
hefC	F: 5'-TGGAAATCACAGAAACTAAAAGC -3'	162
	R: 5'-TGGTTGAAGGGGCGAATTA-3'
gyrB	F: 5'-TTACTACGACTTATCCTGGGGCTAGCGCTG-3'	267
	R: 5'-CCCCATCAATTTCCACATTCTCCGC-3'
hefAM	F: 5'-GCGCTCGAGGTGGGGCTACCACTAATCTC-3'	1298
	R: 5'-CGTCTAGACAATCCCTGTGCTGTCTA-3'
kmR	F: 5'-GCAAGCTTAATGATTGAACAAGATGGATTG-3'	800
	R: 5'-GCAAGCTTTCAGAAGAACTCGTCAAGAAG-3'

黑体部分为基因敲除用酶切位点, F: 上游引物, R: 下游引物.

表2 氯霉素诱导株的多重耐药性比较 (mg/L)

菌株	处理	甲硝唑	琥乙红霉素	环丙沙星	四环素	青霉素G
03154	诱导前MIC	0.125	0.125	0.25	0.25	0.125
	诱导后MIC提高倍数	8×	4×	4×	8×	16×
12025	诱导前MIC	2.0	0.0625	0.125	0.03	0.0625
	诱导后MIC提高倍数	16×	2×	8×	4×	16×
12021	诱导前MIC	4.0	0.125	0.25	0.125	0.0625
	诱导后MIC提高倍数	16×	1×	16×	8×	8×
11032	诱导前MIC	1.0	0.0625	0.0625	0.0625	0.25
	诱导后MIC提高倍数	8×	4×	4×	16×	16×
03174	诱导前MIC	0.5	0.125	0.25	0.125	0.125
	诱导后MIC提高倍数	8×	1×	8×	4×	32×
11637	诱导前MIC	0.5	0.0625	0.125	0.03	0.25
	诱导后MIC提高倍数	4×	2×	4×	8×	16×

表3 敏感野生株及MDR菌株实时定量PCR结果

菌株	WT(gyrB)	WT(hefA)	MDR(gyrB)	MDR(hefA)	WT(hefA/gyrB)	MDR(hefA/gyrB)
03154	0.379	0.71	0.33	0.86	1.87	2.67
12025	0.78	0.25	0.21	0.59	0.32	2.84
12021	0.80	0.98	0.02	0.17	1.22	8.94
11032	0.32	1.26	0.03	0.18	3.84	5.04
03174	0.13	0.54	0.02	0.11	4.16	6.03
11637	0.23	1.03	0.05	0.49	4.41	9.56

WT: 野生敏感株; MDR: 多重耐药株.