修回日期: 2010-03-29
接受日期: 2010-04-07
在线出版日期: 2010-05-18
目的: 探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)Val762Ala, Lys940Arg基因多态性与甘肃省地区汉族人群胃癌易感性的关系.
方法: 采用多重单碱基延伸SNP分型技术(Multiplex SNaPshot)对甘肃省胃癌高发区河西地区汉族人群中经病理确诊的原发性胃癌150例, 健康对照组152例进行PARP-1基因2个SNP位点基因分型. 使用ELISA法检测H.pylori感染.
结果: 发现PARP-1 940Lys/Arg基因型分布在胃癌组明显高于对照组(OR = 2.917, 95%CI: 1.430-5.947, P = 0.002); PARP-1 762 Val/Ala基因型分布在胃癌组明显高于对照组(OR = 1.685, 95%CI: 1.040-2.729, P = 0.034). 分层分析显示, 在吸烟人群中, PARP-1 940Lys/Arg基因型携带者患胃癌的风险是Lys/Lys型携带者的8.430倍(OR = 8.340; 95%CI: 2.664-26.144, P = 0.000); 在饮酒人群中, PARP-1 940Lys/Arg基因型携带者患胃癌的风险是Lys/Lys型携带者的3.333倍(OR = 3.333, 95%CI: 1.214-9.155, P = 0.015), 在H.pylori感染阳性人群中, PARP-1 762Ala/Ala基因型携带者患胃癌的风险是Val/Val携带者的2.360倍(OR = 2.360, 95%CI: 1.256-4.433, P = 0.007). 同时携带PARP-1 940 Lys/Arg和PARP-1 762Ala/Ala+Val/Ala基因型的个体患胃癌的发病风险是PARP-1 940Lys/Lys和PARP-1 762Val/Val基因型携带者的4.2倍(OR = 4.200, 95%CI: 1.430-12.338, P = 0.006).
结论: PARP-1 940Lys/Arg和PARP-1 762Ala/Ala或Ala/Ala基因型与中国甘肃地区汉族人群胃癌发病风险增高相关; PARP-1 Lys940Arg与吸烟, 饮酒, PARP-1 Val762Ala与H.pylori感染以及PARP-1 Lys940Arg与PARP-1 Val762Ala在胃癌的发病风险中都各自存在着加乘交互效应.
引文著录: 康士亮, 李玉民, 何雯婷, 刘涛, 李汛, 周文策, 易剑锋, 曾祥挺. PARP-1基因多态性与胃癌易感性的关系. 世界华人消化杂志 2010; 18(14): 1434-1441
Revised: March 29, 2010
Accepted: April 7, 2010
Published online: May 18, 2010
AIM: To investigate the association between the Val762Ala and Lys940Arg polymorphisms of the poly(ADP-ribose) polymerase-1 (PARP-1) gene and susceptibility to gastric cancer in a Chinese Han population in He'xi area of Gansu Province.
METHODS: All investigated subjects were divided into two groups: 150 gastric cancer patients and 152 controls. The SNaPshot single nucleotide polymorphism (SNP) genotyping method was used to analyze the genotypes of PARP-1 Val762Ala and Lys940Arg. Helicobacter pylori (H.pylori) IgG antibody was detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The results were analyzed using the SPSS16.0 software package.
RESULTS: PARP-1 940 Lys/Arg and 762 Val/Ala genotypes were overrepresented in gastric cancer patients compared with controls (OR = 2.917 and 1.685; 95%CI: 1.430-5.947 and 1.040-2.729; P = 0.002 and 0.034, respectively). In smoking subjects, the risk of gastric cancer in PARP-1 940 Lys/Arg genotype carriers was 8.430-fold higher than that in Lys/Lys carriers (OR = 8.340, 95%CI: 2.664-26.144, P = 0.000). In drinking subjects, PARP-1 940 Lys/Arg genotype carriers had a 3.333-fold higher risk of gastric cancer than Lys/Lys carriers (OR = 3.333, 95%CI: 1.214-9.155, P = 0.015). In H.pylori IgG-positive subjects, PARP-1 762 Ala/Ala genotype carriers had a 2.360-fold increased risk of gastric cancer than Val/Val carriers (OR = 2.360, 95%CI: 1.256-4.433, P = 0.007). The subjects carrying PARP-1 940 Lys/Arg and PARP-1 Ala/Ala or Val/Ala genotypes had a 4.2-fold increased risk of gastric cancer compared with those carrying PARP-1 940 Lys/Lys and PARP-1 762Val/Val genotypes (OR = 4.200, 95%CI: 1.430-12.338, P = 0.006).
CONCLUSION: PARP-1 940Lys/Arg and PARP-1 762Ala/Ala or Ala/Ala genotypes are associated with a higher risk of gastric cancer. There are multiplicative joint effects between PARP-1 940 Lys/Arg genotype and smoking or drinking, between PARP-1 762 Val/Ala or Ala/Ala genotypes and H.pylori infection, and between PARP-1 Lys940Arg and PARP-1 Val762Ala genotypes in increasing the risk of gastric cancer.
- Citation: Kang SL, Li YM, He WT, Liu T, Li X, Zhou WC, Yi JF, Zeng XT. Association between PARP-1 polymorphisms and susceptibility to gastric cancer. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2010; 18(14): 1434-1441
- URL: https://www.wjgnet.com/1009-3079/full/v18/i14/1434.htm
- DOI: https://dx.doi.org/10.11569/wcjd.v18.i14.1434
胃癌是严重危害人类健康的最常见的恶性肿瘤之一, 目前, 在全球范围内, 胃癌发病率居恶性肿瘤第4位, 其死亡率仅次于肺癌居恶性肿瘤第2位[1], 在我国胃癌的发病率和死亡率居全部恶性肿瘤第3位[2]. 甘肃河西地区是我国胃癌的一个高发区, 该地区胃癌检出率为7.79%[3], 高于北京丁士刚等报道的1.95%. 胃癌的发生是遗传因素与环境因素相互作用的结果, 在不良环境因素的长期刺激下人体内易感基因发生变化而引起胃癌. 在胃癌发生的遗传因素中, 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly(ADP ribose) polymerase, PARP]有重要的作用, 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly (ADP ribose) polymerase, PARP]是一个能选择性识别并结合DNA缺口的DNA结合蛋白酶, 主要通过修复DNA单链及双链断裂在维持基因组的完整性方面发挥作用[4,5]. PARP家族共有7个成员, PARP-1是迄今研究得最清楚的一个成员. PARP-1基因存在多个单核苷酸多态性位点, 其中某些位点被报道与恶性肿瘤的易感性相关[6]. 在环境因素中, 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H.pylori)感染与胃癌的发生密切相关. 世界卫生组织国际癌症研究机构将H.pylori定为Ⅰ类致癌原[7]. 我国H.pylori感染率较高, 在甘肃河西地区胃癌患者中H.pylori感染率高达73.5%[8]. 有研究表明, 吸烟, 饮酒等与胃癌发病有关[9]. 本研究选择胃癌高发区甘肃河西地区胃癌患者作为研究对象, 同时取相同地理条件、年龄性别相近的健康人作对照, 对PARP-1 Val762Ala, Lys940Arg多态性与H.pylori感染, 吸烟, 饮酒在胃癌发病风险中的作用进一步做分层分析, 从而把遗传和环境两个因素综合起来探索胃癌发生的分子机制.
胃癌组150例, 来自甘肃省河西三地区(张掖, 武威, 酒泉), 20岁以上, 在当地居住满20年以上, 三代无族外通婚的汉族居民, 2008-09/2009-11经"二甲"以上医院住院或接受胃镜检查并满足上述条件的汉族居民, 均经组织病理学确诊. 健康对照组152例, 来自同一时期该地区的按性别、年龄(±5岁)配对, 并排除肿瘤和消化系统疾病的健康汉族志愿者. 征得研究对象同意, 并采集以下信息: (1)人口学特征, 如年龄、性别等; (2)吸烟(每日吸2支以上, 连续吸1年以上), 饮酒史(每周饮酒≥2次, 每次≥100 g, 持续时间至少达半年). 每位研究对象自愿贡献外周静脉血5 mL(EDTA抗凝), -70 ℃冰箱保存.
1.2.1 血清H.pylori免疫印迹分型检测: 血清H.pylori免疫印迹试剂盒购自深圳伯劳特公司, 使用幽门螺杆菌IgG酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测是否有H.pylori感染, 按实验操作步骤进行.
1.2.2 基因多态性位点分型: 采用全血基因组DNA提取系统(非离心柱型)抽提外周血基因组DNA(TaKaRa Bio, Japan). DNA样本取1 μL 1% agarose电泳对其样本进行质量检查以及浓度估计, 然后根据估计的浓度将样本稀释到工作浓度5-10 mg/L. 利用多重单碱基延伸SNP分型技术(Multiplex SNaPshot)对302个样本进行PARP-1基因Val762Ala, Lys940Arg2个SNP位点分型. (1)PARP-1基因Val762Ala, Lys940Arg的PCR引物及其延伸引物用Primer3软件设计(http://frodo.wi.mit.edu/cgi-bin/primer3/primer3_http://www.cgi). PARP-1Val762Ala的PCR引物及延伸引物分别为: rs1136410F 5'-GCAGGAGGGTTTGCCATTCAC-3'; rs1136410R 5'-CAGACCCTCCCCTGAGCAGAC-3'; 延伸引物: 5'-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTAGCAGGTTGTCAAGCATTTCC-3'; PARP-1 Lys940Arg的PCR引物及延伸引物分别为rs3219145F 5'-gcccagtgtgaaggcctcttct-3'; rs3219145R 5'-tttgacactgtgcttgcccttg-3'; 延伸引物: 5'-TTTTTTTTTGTGCTTGCCCTTGGGTAAC-3'; (2)PCR反应体系(20 μL): ddH2O 13 μL, 10×BufferⅠ 2 μL, dNTP(10 mmol/L), MgCl2(25 mmol/L)1.2 μL, Primer(s)2 μL, HotTaq(5 U/μL)0.2 μL, Template(1-5 mg/L)1 μL, DNA. 反应体系中各对引物的浓rs1136410F/R 1 μmol/L, rs3219145F/R 1 μmol/L. PCR循环程序: 95 ℃变性15 min; 94 ℃变性40 s, 63 ℃退火1 min, 每个循环下降0.5 ℃, 72 ℃延伸C 1 min 40 s, 共15个循环. 然后94 ℃变性20 s, 56 ℃退火30 s, 72 ℃延伸1.5 min, 共24个循环. 最后72 ℃延伸2 min. 结束后4 ℃保存. (3)PCR产物纯化: 在10 μL PCR产物中加入1 U SAP酶(Promega)和1 U ExonucleaseⅠ酶(Epicentre), 37 ℃温浴1 h, 然后75 ℃灭活15 min. (4)SNaPshot多重单碱基延伸反应: 延伸反应体系(10 μL)包括5 μL SNaPshot Multiplex Kit(ABI), 2 μL纯化后多重PCR产物, 1 μL延伸引物混合物, 2 μL超纯水. 反应体系中各对引物的浓度: rs1136410SF 0.8 μmol/L, rs3219145SR 0.6 μmol/L. PCR循环程序: 96 ℃变性1 min; 然后96 ℃变性10 s, 50 ℃退火5 s, 60 ℃延伸30 s, 共28个循环. 最后60 ℃延伸1 min. 结束后4 ℃保存. (5)延伸产物纯化: 在10 μL延伸产物中加入1 U SAP酶, 37 ℃温浴1 h, 然后75 ℃灭活15 min. (6)DNA测序仪(ABI3130XL)测序: 取0.5 μL纯化后的延伸产物, 与0.5 μL Liz120 SIZE STANDARD, 9 μL Hi-DiFormamide(高纯甲酰胺)混匀, 95 ℃变性5 min后上ABI3130XL测序仪, 收集的原始数据用GeneMapper 4.0(AppliedBiosystems Co., Ltd., USA)来分析.
统计学处理 χ2检验比较各基因型在两组中的分布差异. 以非条件Logistic回归计算比值比(odds ratio, OR)及其95%可信区间(confidence interval, CI)评价各基因型与胃癌发病风险的关系. 所用统计学分析软件为SPSS16.0. 所有统计检验均为双侧概率检验.
两组间的年龄, 性别, 吸烟, 饮酒无统计学意义(P>0.05). 胃癌组H.pylori感染率明显高于对照组(P = 0.000, 表1).
| 基本特征 | 正常对照组 | 胃癌组 | P值 |
| 年龄(岁) | |||
| (mean±SD) | 58.7±11.2 | 59.7±9.6 | 0.394 |
| <60 | 65(42.8) | 61(40.7) | 0.712 |
| ≥60 | 87(57.2) | 89(59.3) | |
| 性别 | |||
| 女 | 49(32.2) | 46(30.7) | 0.769 |
| 男 | 103(67.8) | 104(69.3) | |
| 吸烟 | |||
| 不吸 | 86(56.6) | 90(60.0) | 0.547 |
| 吸 | 60(40.0) | ||
| 饮酒 | |||
| 不饮 | 74(48.7) | 81(54.0) | 0.355 |
| 饮 | 78(51.3) | 69(46.0) | |
| H. pylori感染 | |||
| 阳性 | 68(44.7) | 102(68.0) | 0.000 |
| 阴性 | 84(55.3) | 48(32.0) |
PARP-1Lys940Arg多态位点有AA, GA, GG3种基因型, 本次实验无基因型为GG的样本(图1). Val762Ala多态位点有TT, TC, CC3种基因型(图2). Lys940Arg和Val762Ala的基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡规律(P = 0.612, 0.174; P = 0.089, 0.589). 以PARP-1Lys940Arg基因型AA的OR为1.00, PARP-1Lys940Arg基因型GA有显著增高的胃癌发病风险(OR = 2.917, 95%CI: 1.430-5.947, P = 0.002). 以PARP-1Val762Ala基因型TT的OR为1.00, Val762Ala基因型TC有显著增高的胃癌发病风险(OR = 1.685, 95%CI: 1.040-2.729, P = 0.034, 表2).
| Val762Ala(%) | Lys940Arg(%) | ||||||
| TT | TC | CC | TC+CC | AA | GA | GG | |
| 正常对照组 | 88(57.9) | 50(32.9) | 14(9.2) | 64(42.1) | 140(92.1) | 12(7.9) | 0(0) |
| 胃癌组 | 70(46.7) | 67(44.7) | 13(8.7) | 80(53.3) | 120(80.0) | 30(20.0) | 0(0) |
| OR | 1.000 | 1.685 | 1.167 | 1.571 | 1.000 | 2.917 | - |
| 95%CI | - | 1.040-2.729 | 0.515-2.644 | 0.997-2.476 | - | 1.430-5.947 | - |
| P值 | 0.034 | 0.711 | 0.051 | 0.002 | - | ||
PARP-1Lys940Arg基因多态性与胃癌相关性的分层分析(表3): 在吸烟, 饮酒人群中, Lys940Arg基因型GA患胃癌风险分别是AA型的8.436, 3.333倍(OR = 8.436, 95%CI: 2.664-26.144, P = 0.000; OR = 3.333, 95%CI: 1.214-9.155, P = 0.015). PARP-1Val762Ala基因多态性与胃癌相关性的分层分析(表4), 在H.pylori感染人群中, Val762Ala基因型TC+CC患胃癌风险是TT型的2.360倍(OR = 2.360, 95%CI: 1.256-4.433, P = 0.007), 在吸烟, 饮酒中无明显差异.
| 分层 | 正常对照组n | 胃癌组n | P值 | OR | 95%CI | ||
| AA | GA+GG | AA | GA+GG | ||||
| H. pylori感染 | |||||||
| 阳性 | 60 | 8 | 78 | 24 | 0.055 | 2.308 | 0.969-5.498 |
| 阴性 | 80 | 4 | 42 | 6 | 0.106 | 2.875 | 0.764-10.686 |
| 吸烟 | |||||||
| 不吸 | 78 | 8 | 81 | 9 | 0.876 | 1.083 | 0.398-2.950 |
| 吸 | 62 | 4 | 39 | 21 | 0.000 | 8.436 | 2.664-26.144 |
| 饮酒 | |||||||
| 不饮 | 68 | 6 | 66 | 15 | 0.059 | 2.567 | 0.942-7.070 |
| 饮 | 72 | 6 | 54 | 15 | 0.015 | 3.333 | 1.214-9.155 |
| 分层 | 正常对照组n | 胃癌组n | P值 | OR | 95%CI | ||
| TT | TC+CC | TT | TC+CC | ||||
| H. pylori感染 | |||||||
| 阳性 | 43 | 25 | 43 | 59 | 0.007 | 2.36 | 1.256-4.433 |
| 阴性 | 45 | 39 | 27 | 21 | 0.314 | 1.447 | 0.704-2.973 |
| 吸烟 | |||||||
| 不吸 | 37 | 29 | 27 | 33 | 0.215 | 1.559 | 0.772-3.151 |
| 吸 | 51 | 35 | 43 | 47 | 0.126 | 1.593 | 0.877-2.893 |
| 饮酒 | |||||||
| 不饮 | 42 | 32 | 36 | 45 | 0.126 | 1.641 | 0.869-3.097 |
| 饮 | 46 | 32 | 34 | 35 | 0.239 | 1.480 | 0.770-2.843 |
与对照组相比, 在胃癌组中携带PARP-1940Lys/Arg基因型者更可能同时携带PARP-1762Ala/Ala+Val/Ala基因型. 而同时携带PARP-1940Lys/Arg和PARP-1762Ala/Ala+Val/Ala基因型的个体患胃癌的发病风险是PARP-1Lys/Lys和PARP-1Val/Val基因型(野生型)携带者的4.2倍(OR = 4.200; 95%CI: 1.430-12.338; P = 0.006). 此OR值明显高于PARP-1940Lys/Arg基因型与PARP-1Lys/Lys基因型相比的OR值, 也高于PARP-1762Ala/Ala+Val/Ala基因型与Val/Val基因型相比的OR值. 这一结果表明: PARP-1940Lys/Arg基因型和PARP-1762Ala/Ala+Val/Ala基因型在胃癌的发病风险中存在着明显的加乘交互效应(表5).
| 基因型 | 正常对照组 | 胃癌组 | P值 | OR | 95%CI | |
| Lys940Arg | Val762Ala | |||||
| Lys/Lys | Val/Val | 81 | 54 | 1.000 | ||
| Lys/Lys | Val/Ala+Ala/Ala | 59 | 66 | 0.039 | 1.678 | 0.026-2.744 |
| Lys/Arg | Val/Val | 7 | 16 | 0.008 | 3.429 | 1.323-8.888 |
| Lys/Arg | Val/Ala+Ala/Ala | 5 | 14 | 0.006 | 4.200 | 1.430-12.338 |
胃癌发生的机制复杂, 目前研究认为他与遗传因素和环境因素有关, 这二者因素在胃癌的发生中相互作用, 相互影响. 仅有个体的遗传变异, 并不造成细胞的癌变, 而是需要适当的环境因素参与. 个体的遗传易感性是由于一些与肿瘤发生相关的基因存在多态性, 其遗传学基础是人类基因组DNA序列的变异性, 其中最常见的是单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)[10]. SNP是指染色体基因组水平单个核苷酸变异引起的DNA序列多态性, 在人群中发生率大于1%, 是基因组变异最丰富的一种DNA序列变化形式. SNP是一种较好地反映个体遗传差异的分子标记, 他能反映个体表型、疾病易感性和对药物、环境因子反应的差异. 单核苷酸多态性与肿瘤易感性关系的研究只有充分考虑环境、生物、遗传、种族、地域等诸多因素, 才能建立起与某一特定肿瘤易感性之间较为明确的关系, 为肿瘤的预防和治疗提供依据.
在抑制基因变异, 癌症发生过程中, DNA修复基因在保护维持基因组的完整性修复方面发挥作用, PARP-1是一个能选择性识别并结合DNA缺口的DNA结合蛋白酶, 参与因电离辐射和氧化损伤引起的碱基切除修复和单链断裂. Lockett等[6]研究显示PARP-1Val762Ala的Ala/Ala基因型能增加前列腺癌的易感性, 降低酶的活性. Cao等[11]研究发现PARP-1基因变异与法国人群乳腺癌增高相关. 研究发现, PARP-1的多态性与多种肿瘤易感性相关, 在其高度保守的接触反应区存在的两个多态位点Val762Ala和Lys940Arg, 与生殖细胞肿瘤易感性增高相关[12]、与吸烟的交互作用可明显增高肺癌易感性[13]. PARP-1以NAD为底物可以催化多种蛋白的聚ADP核糖基化, 包括组蛋白、XRCC1、NF-κB、P53及PARP-1自身[14]. PARP-1通过其N末端的锌指DNA结合区及其中央的BRCT区与XRCC1发生作用, DNA损伤后, PARP-1被DNA缺口激活, 以XRCC1作为脚手架蛋白, 通过直接与聚合酶β、DNA连接酶Ⅲ形成复合物, 合成并转运长链ADP核糖多聚体到DNA修复蛋白上, 参与因电离辐射和氧化损伤引起的碱基切除修复和单链断裂修复[15]. 在肿瘤治疗尤其是恶性肿瘤治疗方面, 其策略是对肿瘤细胞的特异杀伤, 而对正常细胞DNA影响甚微的靶向治疗, PARP-1有望成为有效而特异的抗肿瘤靶分子之一[16]. 利用siRNA干扰PARP-1, 从而改变PARP-1和聚ADP核糖水解酶[poly (ADP-ribose) glycohydrolase, PARG]的平衡, PARG活性相对增强因而聚腺苷酸二磷酸核糖(PAR)降解过多, 这种作用相当于PARP抑制剂[17]. 研究发现PARP-1基因缺陷的小鼠对烷化物诱发的肿瘤的易感性增高[12].
本研究发现携带PARP-1940Lys/Arg基因型的个体患胃癌的风险是Lys/Lys携带者的2.917倍(OR = 2.917, 95%CI: 1.430-5.947, P = 0.002). PARP-1762Val/Ala基因型个体患胃癌的风险是Val/Val携带者的1.685倍(OR = 1.685, 95%CI: 1.040-2.729, P = 0.005), 这一研究结果与先前Lockett等和Zhang等的报道基本一致. 通过数据分析, 我们认为PARP-1Lys940Arg, Val762Ala多态性与胃癌的发病风险相关. 而且通过分层分析, 发现在吸烟, 饮酒的人群中, 携带PARP-1 940Lys/Arg基因型者与胃癌的发病风险存在着更强的关系, 在H.pylori IgG阳性的人群中, 携带PARP-1762Ala/Ala+Val/Ala基因型者与胃癌的发病风险存在着更强的关系. 这一结果证实了在胃癌的发生中, 基因-环境的交互作用是很重要的. 长期吸烟的个体, 发生糜烂性胃炎、萎缩性胃炎和溃疡等癌前病变的风险明显增大[18]. 国外很多实验室研究成果认为吸烟是胃癌的危险因素, 吸烟可能导致个体罹患胃癌的风险增加到1.62倍[9], 最近的研究发现, 吸烟会减少胃黏膜合成前列腺素进而使胃黏膜微循环血管产生障碍, 导致胃上皮细胞损伤, 从而增加了胃癌发生的风险[19]. 酒精与辛辣食物[20,21]对胃黏膜的刺激相当大, 长期大量饮酒及进食辛辣食物, 会损伤胃黏膜, 使胃黏膜充血、水肿、甚至糜烂, 慢性胃炎发生率明显增高, 细菌繁殖增加, 促进了致癌物亚硝胺类的合成[22]. 循证医学Meta分析的研究数据也表明饮酒高危人群患胃癌的归因危险百分比为50.74%, 而一般人群只为17.784%[23]. 研究表明酒精在代谢过程中不但生成乙醛、乙酸、大量自由基等因素, 还会扰乱体内一碳单位的代谢、进而干扰DNA甲基化、影响核酸合成等生理活动, 可能是酒精导致胃癌危险增高的一个重要原因[24]. H.pylori是胃癌的主要发病原因之一, 个体感染H.pylori后只有一部分发生胃炎、胃溃疡继而进一步发展成胃癌, 这可能与H.pylori携带不同致病因子有关[25,26]. 大量研究提示患病风险增高的原因是由细菌的毒力因素(VacA和CagA等)[27,28], 宿主的反应性(遗传易感性、肠上皮化生)和环境因素(饮食、获得感染的年龄)等多种因素相互作用的复杂结果. H.pylori通过其毒力因子会氧化损伤胃黏膜上皮细胞的DNA. H.pylori产生的毒力因子包括菌毛、鞭毛、尿素酶、细胞毒素、空泡细胞毒素等[29], 临床根据H.pylori的Cag致病岛和VacA基因型将H.pylori分为高毒力株和低毒力株[30]. 其中研究证明CagA基因是H.pylori高毒力株的标志基因, 与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌的发生密切相关[31,32]. CagA因子可以损害胃黏膜, 导致胃黏膜上皮细胞更新加速, 进而增加DNA损伤的机会, 从而引起细胞突变最终导致癌细胞的形成[33]. H.pylori可能是慢性胃炎向胃黏膜不典型增生及胃癌发展的重要启动因子[34], 感染后引起的炎细胞浸润及黏膜的损害与细胞因子的产生密切相关[35,36].
在本实验中, 通过对PARP-1 Val762Ala, Lys940Arg的交互作用分析发现: 同时携带PARP-1940Lys/Arg和PARP-1762Ala/Ala+Val/Ala基因型的个体患胃癌的发病风险是同时携带PARP-1940Lys/Lys和PARP-1762Val/Val基因型携带者4.2倍, 这一结果表明: PARP-1940Lys/Arg基因型和PARP-1762Val/Val+Val/Ala基因型在胃癌的发病风险中存在着明显的加乘交互效应, 这说明在胃癌的发生是基因多位点共同参与的结果. PARP-1的Val762Ala或Lys940Arg的基因变异可导致PARP-1酶活性下降, 修复DNA损伤的能力降低, 他们共存时则更加增高了个体对胃癌的发病风险.
由于涉及癌变过程的基因-基因、基因-环境因素相互作用关系错综复杂, 本研究只能视为初步研究, 而且本研究显示PARP-1Lys940Arg的C等位基因频率较低(在正常对照组, 胃癌组分别为0.039, 0.100), 有关结论有必要进一步扩大样本验证.
在我国胃癌的发病率和死亡率居各种恶性肿瘤第3位, 甘肃河西地区是我国胃癌的一个高发区, 胃癌的发生是遗传因素与环境因素相互作用的结果, 把遗传和环境两个因素综合探讨胃癌危险因素、发病机制及预防措施是当前科学研究的重要任务.
郑鹏远, 教授, 郑州大学第二附属医院消化科; 王小众, 教授, 福建医科大学附属协和医院消化内科
聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)作为一种非常重要的DNA修复基因被广泛关注, 目前对于PARP-1的SNP与肿瘤的易感性的研究, 主要集中生殖系肿瘤、肺癌及乳腺癌等方面, 但有关PARP-1的SNP与胃癌易感性的关系尚不明确.
Lockett等研究显示PARP-1Val762Ala的Ala/Ala基因型能增加前列腺癌的易感性, 降低酶的活性. 曹文辉等研究发现PARP-1基因变异与法国人群乳腺癌增高相关. Motoko Shiokawa等研究发现, PARP-1的多态性与多种肿瘤易感性相关, 在其高度保守的接触反应区存在的两个多态位点Val762Ala和Lys940Arg.
本研究对PARP-1 Val762Ala, Lys940Arg两个对PARP-1基因功能有重要影响的位点对PARP-基因SNP与胃癌关系进行研究, 具有明显的创新性, 同时, 本研究采用国内很少应用的多重单碱基延伸SNP分型技术(multiplex SNaPshot), 准确性高, 方法新颖.
本文通过对PARP-1基因多态性与胃癌易感性的关系进行研究, 揭示了中国甘肃省河西地区胃癌患者PARP-1基因多态性及胃癌发病风险, 对胃癌防治具有一定意义.
本研究从遗传角度对胃癌易感性进行研究, 资料详实, 内容丰富, 具有一定的理论意义和潜在的临床价值.
编辑: 李军亮 电编: 何基才
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