circCLK3通过靶向miR-654-5p促进结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的机制研究

图1 circCLK3和miR-654-5p在结直肠癌组织中的表达. A: 结直肠癌中circCLK3高表达; B: 结直肠癌中miR-654-5p低表达. ^aP<0.05, 与Normal组(癌旁组织)比较.

图2 circCLK3敲低影响SW620细胞增殖. A: 干扰circCLK3转染效率的检测; B: 干扰circCLK3对结直肠癌细胞活力的影响; C: 干扰circCLK3对结直肠癌细胞克隆形成数影响. ^aP<0.05, 与si-NC组比较. OD value: 光密度值.

图3 circCLK3敲低影响SW620细胞迁移、侵袭和相关蛋白表达. A: 干扰circCLK3对结直肠癌细胞迁移的影响; B: 干扰circCLK3对结直肠癌细胞侵袭的影响; C: 迁移侵袭相关蛋白表达. ^aP<0.05, 与si-NC 组比较. MMP-2: 基质金属蛋白酶-2; MMP-9: 基质金属蛋白酶-9; GAPDH: 甘油醛-3-磷酸脱氢酶.

图4 circCLK3靶向miR-654-5p. A: circCLK3含有miR-654-5p的互补序列; B: 双荧光素酶报告实验; C: miR-654-5p的表达被circCLK3调控. ^aP<0.05, 与miR-NC组比较; ^bP<0.05, 与pcDNA组比较; ^cP<0.05, 与si-NC组比较.

图5 过表达miR-654-5p影响SW620细胞增殖、迁移、侵袭和相关蛋白表达. A: 过表达miR-654-5p转染效率的检测; B: 过表达miR-654-5p对结直肠癌细胞活力的影响; C: 过表达miR-654-5p对结直肠癌细胞克隆形成数影响; D: 过表达miR-654-5p对结直肠癌细胞迁移的影响; E: 过表达miR-654-5p对结直肠癌细胞侵袭的影响; F: 迁移侵袭相关蛋白表达. ^aP<0.05, 与miR-NC组比较. MMP-2: 基质金属蛋白酶-2; MMP-9: 基质金属蛋白酶-9; GAPDH: 甘油醛-3-磷酸脱氢酶.

图6 抑制miR-654-5p逆转了circCLK3敲低对细胞增殖、迁移、侵袭和相关蛋白表达的影响. A: miR-654-5p在结直肠癌细胞中的表达; B: 结直肠癌细胞的活力; C: 结直肠癌细胞的克隆形成数; D: 结直肠癌细胞的迁移; E: 结直肠癌细胞的侵袭; F: 迁移侵袭相关蛋白表达. ^aP<0.05, 与si-circCLK3+anti-miR-NC组比较. MMP-2: 基质金属蛋白酶-2; MMP-9: 基质金属蛋白酶-9; GAPDH: 甘油醛-3-磷酸脱氢酶.

图7 circCLK3通过靶向miR-654-5p促进结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭示意图.