五味子甲素增强奥沙利铂对结直肠癌细胞的杀伤作用

图1 SchA和L-OHP对结直肠癌细胞的细胞活力的影响. A, B: MTT法检测L-OHP对SW480(A)和HT-29(B)细胞的细胞活力的影响; C, D: MTT法检测SchA对SW480(C)和HT-29(D)细胞的细胞活力的影响. mean±SD, n = 3, 与0 μmol/L组相比, ^aP<0.05; E, F: MTT法检测SchA(10 μmol/L)联合L-OHP(2 μmol/L)对SW480(E)和HT-29(F)细胞的细胞活力的影响. mean±SD, n = 3, 与对照(Ctrl)组相比, ^aP<0.05, ^cP<0.05, 与单用L-OHP组相比, ^bP<0.05, ^dP<0.05. SchA: 五味子甲素; L-OHP: 奥沙利铂; MTT: 噻唑蓝.

图2 SchA对L-OHP诱导结直肠癌细胞凋亡的影响. A, B: 流式细胞术检测各组SW480细胞的凋亡. mean±SD, n = 3, 与对照(Ctrl)组相比, ^aP<0.05, 与单用L-OHP组相比, ^bP<0.05; C, D: 流式细胞术检测各组HT-29细胞的凋亡. mean±SD, n = 3, 与对照(Ctrl)组相比, ^aP<0.05, 与单用L-OHP组相比, ^bP<0.05. SchA: 五味子甲素; L-OHP: 奥沙利铂.

图3 SchA增强L-OHP诱导的细胞中ROS蓄积. A, B: H2DCFDA探针检测各组SW480细胞中ROS的水平. mean±SD, n = 3, 与对照(Ctrl)组相比, ^aP<0.05, 与单用L-OHP组相比, ^bP<0.05; C, D: H2DCFDA探针检测各组HT-29细胞中ROS的水平. mean±SD, n = 3, 与对照(Ctrl)组相比, ^aP<0.05, 与单用L-OHP组相比, ^bP<0.05. SchA: 五味子甲素; L-OHP: 奥沙利铂; ROS: 活性氧簇.

图4 SchA对L-OHP诱导的线粒体膜的影响. A, B: 5,5',6,6'-四氯-1,1',3,3'-四乙基苯并咪唑羰花青碘化物(JC-1)探针检测各组SW480细胞中线粒体膜电位水平. mean±SD, n = 3, 与对照(Ctrl)组相比, ^aP<0.05, 与单用L-OHP组相比, ^bP<0.05; C, D: JC-1探针检测各组HT-29细胞中线粒体膜电位水平. mean±SD, n = 3, 与对照(Ctrl)组相比, ^aP<0.05, 与单用L-OHP组相比, ^bP<0.05. SchA: 五味子甲素; L-OHP: 奥沙利铂.

图5 SchA对L-OHP诱导的线粒体凋亡通路相关蛋白表达的影响. A-D: Western blot检测各组SW480(A, B)和HT-29(C, D)细胞中Bcl-2和Bax的表达水平. mean±SD, n = 3, 与对照(Ctrl)组相比, ^aP<0.05, ^cP<0.05, ^eP<0.05, ^gP<0.05, 与单用L-OHP组相比, ^bP<0.05, ^dP<0.05, ^fP<0.05, ^hP<0.05; E-H: Western blot检测各组SW480(E, F)和HT-29(G, H)细胞中Cyt c释放情况. mean±SD, n = 3, 与对照(Ctrl)组相比, ^aP<0.05, ^cP<0.05, ^eP<0.05, ^gP<0.05, 与单用L-OHP组相比, ^bP<0.05, ^dP<0.05, ^fP<0.05, ^hP<0.05; I-M: Western blot检测各组SW480(I, J)和HT-29(L, M)细胞中cleaved caspase-3表达水平. mean±SD, n = 3, 与对照(Ctrl)组相比, ^aP<0.05, ^cP<0.05, 与单用L-OHP组相比, ^bP<0.05, ^dP<0.05. SchA: 五味子甲素; L-OHP: 奥沙利铂; Bcl-2: B-细胞淋巴瘤-2; Bax: Bcl-2相关X蛋白; Cyt c: 细胞色素c; cleaved caspase-3: 劈开的半胱氨酸蛋白酶-3.