CRISPRi在体抑制肝脏miR-122的表达

图1 CRIPSRi在体抑制肝脏miR-122表达. A: 小鼠尾静脉流体力学注射模式图; B: CRIPSRi抑制miR-122表达原理模式图; C: 在mmu-miR-122启动子区选择2个PAM位点, 并设计相应的sgRNA序列; D: CRIPSRi在体抑制肝脏miR-122的表达. dCas9: 转染dCas9-KRAB和lentiGuide-Puro质粒组; dCas9+T1: 转染dCas9-KRAB和lentiGuide-Puro-sgT1质粒组; dCas9+T2: 转染dCas9-KRAB和lentiGuide-Puro-sgT2质粒组. ^bP<0.01 vs 对照组. CRIPSRi: CRISPR干扰; Cas: CRISPR相关基因.

图2 CRIPSRi在体抑制肝细胞miR-122表达依赖于sgRNA的剂量. 各组转染dCas9-KRAB质粒为60 μg. ^bP<0.01 vs 对照组. CRIPSRi: CRISPR干扰; Cas: CRISPR相关基因.

图3 在体CRIPSRi上调肝脏miR-122靶分子HMOX1和Cyclin G1表达. A: CRIPSRi显著上调肝脏miR-122靶分子HMOX1和Cyclin G1 mRNA水平; B: Western blot结果显示CRIPSRi上调肝脏HMOX1蛋白表达; C: Western blot结果显示CRIPSRi上调肝脏Cyclin G1蛋白表达. ^bP<0.01 vs HMOX1对照组; ^dP<0.01 vs Cyclin G1对照组. CRIPSRi: CRISPR干扰.