构建Tet-on调控稳定表达肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子-4的人类MSCs细胞株

图1 慢病毒转染方法示意图.

图2 Lenti6. 3/TO/FGF-4-EGFP在荧光显微镜下同一视野的照片(×400). A: 荧光照片; B: 可见光照片. FGF4: 成纤维细胞生长因子-4.

图3 HGF、FGF4在细胞中表达与Tet浓度的关系. A: HGF在UE7T-13-TR-HGF细胞中表达与Tet浓度的关系; B: FGF4在UE7T-13-TR-FGF4细胞中的表达与Tet浓度的相关性. HGF: 肝细胞生长因子; FGF4: 成纤维细胞生长因子-4.

图4 Western blot检测结果. A: 内参GAPDH; B: HGF; C: FGF4. 1: UE7T-13细胞; 2: UE7T-13-TR细胞; 3: UE7T-13-TR-HGF细胞+tetracycline; 4: UE7T-13-TR-FGF4细胞+tetracycline. HGF: 肝细胞生长因子; FGF4: 成纤维细胞生长因子-4; tetracycline: 四环素.

图5 ELISA检测细胞上清液, 验证HGF/FGF4目的蛋白分泌表达情况. A: UE7T-FGF细胞能成功的表达分泌型HGF蛋白, 且细胞中Tet-on基因开关调控效果良好; B: UE7T-FGF细胞能成功的表达分泌型FGF4蛋白, 且细胞中Tet-on基因开关调控效果良好. HGF: 肝细胞生长因子; FGF4: 成纤维细胞生长因子-4.