人Cdc25C基因克隆及其原核表达载体的构建与表达

图1 Cdc25C基因编码区PCR扩增. M: DNA marker(DL 1500); 1-2: Cdc25C基因编码区RT-PCR扩增产物.

图2 pMD18-T-Cdc25C阳性重组质粒测序与BLAST比对结果(部分).

图3 pET-32a(+)-Cdc25C阳性重组质粒测序与BLAST比对结果(部分).

图4 pET-32a(+)-Cdc25C重组质粒IPTG小量诱导表达. 图中箭头所指为TRx-His-Cdc25C融合蛋白. M: ProteinRulerTM ⅡMarker; 1: 未诱导的BL21(DE3)菌体蛋白; 2: IPTG诱导的BL21(DE3)菌体蛋白; 3: 未诱导的Transetta(DE3)菌体蛋白; 4: IPTG诱导的Transetta(DE3)菌体蛋白; 5: 未诱导的BL21(DE3)pLysS菌体蛋白; 6: IPTG诱导的BL21(DE3)pLysS菌体蛋白.

图5 pET-32a(+)-Cdc25C重组质粒在ArtMediaTM Protein Expression自动诱导表达. 图中箭头所指为TRx-His-Cdc25C融合蛋白. M: ProteinRulerTM ⅡMarker; 1: 未诱导的BL21(DE3)菌体蛋白; 2: ArtMediaTM Protein Expression培养基诱导的BL21(DE3)菌体蛋白; 3: 未诱导的Transetta(DE3)菌体蛋白; 4: ArtMediaTM Protein Expression培养基诱导的Transetta(DE3)菌体蛋白; 5: 未诱导的BL21(DE3)pLysS菌体蛋白; 6: ArtMediaTM Protein Expression培养基诱导的BL21(DE3)pLysS菌体蛋白.

图6 Cdc25C蛋白全长氨基酸序列. 图中红色的区域表示通过质谱法测序匹配的肽.