重叠延伸PCR法克隆重组复合干扰素

图1 重叠延伸PCR法扩增cIFN. A: 重叠延伸PCR法原理示意图; B: cIFN的PCR产物. 1: Marker; 2: cIFN第一次PCR产物; 3: cIFN第二次PCR产物

图2 cIFN的表达及纯化. A: cIFN的SDS-PAGE; B: cIFN的Western blotting. 1: Marker; 2: 培养菌液上清; 3: 超声破碎后上清; 4: 包涵体成份. 检测抗体为抗(His)6IgG-HRP. C: 亲和层析法纯化后cIFN的SDS-PAGE. 1: Marker; 2: 包涵体总成份; 3: 柱通过; 4: 柱洗涤; 5: 柱洗脱

图3 cIFN的活性鉴定. A: cIFN的ELISA法免疫活性结果; B: cIFN的MTS法细胞增殖抑制活性结果; C: cIFN的血凝抑制法HBsAg分泌抑制活性结果. a: 实验组, 1: 阳性对照; 2: 0 mg/L; 3: 1.56 mg/L; 4: 3.125 mg/L; 5: 6.25 mg/L; 6: 12.5 mg/L; 7: 25 mg/L; 8: 50 mg/L; b: 阴性对照组