肝细胞生成素205与细胞色素C的相互作用

图1 HPO205和Cytc蛋白编码基因PCR扩增示意图. 1:DNA marker 2 kDa; 2: CYCS(318 bp); 3-4:GRER(618 bp).

图2 酵母双杂交筛选相互作用表型鉴定. A: 母板(B、C和母板的酵母克隆位置对应)图中白色线段即为画线生长的酵母单克隆, 指示的a-e为对照菌, 从a-e相互作用由阴性逐渐增强到强阳性; B: LacZ表型, 阳性菌落应显蓝, 白色表示阴性, 和a-e对照菌对比判断阳性和强弱; C: Ura和His表型, 生长菌落为阳性菌落(pDBLeu-GFER+pPC86-CYCS, 图中pDBLeu-CYCS+pPC86-GFER阴性结果未显示出来), 和a-e对照菌对比判断阳性和强弱.

图3 SDS-PAGE电泳后考染检测GST空蛋白以及GST-融合蛋白表达情况. 1: 预染蛋白marker; 2: GST-CYCS(37 kDa)全菌; 3: GST-CYCS上清; 4: GST-CYCS沉淀; 5: 未经IPTG诱导菌对照; 6: GST空蛋白(26 kDa)全菌; 7: GST空蛋白上清; 8: GST空蛋白沉淀.

图4 GST-Pull down验证HPO205和Cytc相互作用. 1:Input(pCMV-Myc-GFER); 2: GST+pCMV-Myc-GFER; 3: GST-CYCS+pCMV-Myc-GFER.