临床研究
Copyright ©The Author(s) 2021. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2021-09-08; 29(17): 990-998
Published online 2021-09-08. doi: 10.11569/wcjd.v29.i17.990
lncRNA CCDC183-AS1通过靶向miR-1301-3p调控胃癌AGS细胞的增殖、迁移和侵袭
张红英, 何陈聪, 钟定福
张红英, 何陈聪, 钟定福, 金华市人民医院消化内科 浙江省金华市 321000
张红英, 研究生学历, 主要从事胃肠道疾病研究.
作者贡献分布: 张红英与钟定福对此文所作贡献两均等; 此课题由张红英, 何陈聪, 钟定福设计; 研究过程由张红英, 何陈聪, 钟定福操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由何陈聪提供; 数据分析由张红英, 何陈聪, 钟定福完成; 本论文写作由张红英完成.
通讯作者: 钟定福, 本科, 主治医师, 321000, 浙江省金华市金东区丹溪东路267号, 金华市人民医院消化内科. 1772143482@qq.com
收稿日期: 2021-04-22
修回日期: 2021-05-20
接受日期: 2021-06-28
在线出版日期: 2021-09-08
文章亮点
实验背景

胃癌的致病机理尚不明确, 已有研究发现长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)的异常表达与胃癌细胞的恶性生物学行为有关, 但lncRNA CCDC183-AS1对胃癌细胞恶性生物学行为的影响尚未可知.

实验动机

lncRNA CCDC183-AS1在肝细胞癌中表达上调, 促进肝细胞癌细胞的增殖、迁移和侵袭以及体内肿瘤的生长和转移, 但其对胃癌细胞的影响及分子机制还尚未可知. StarBase预测显示, lncRNA CCDC183-AS1可能靶向结合miR-1301-3p. 已有研究称, 沉默miR-1301-3p可消除下LINC01207对胃癌细胞生长和迁移的抑制作用. 但lncRNA CCDC183-AS1能否靶向调控miR-1301-3p影响胃癌细胞 的增殖、迁移和侵袭尚不清楚. 因此, 探究lncRNA CCDC183-AS1对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其能否靶向miR-1301-3p发挥作用, 以期为胃癌治疗提供新思路.

实验目标

探究lncRNA CCDC183-AS1对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其能否靶向miR-1301-3p发挥作用, 为胃癌治疗提供新思路.

实验方法

RT-qPCR检测胃癌组织和细胞中lncRNA CCDC183-AS1和miR-1301-3p的表达. 分别转染lncRNA CCDC183-AS1小干扰RNA、miR-1301-3p模拟物至胃癌细胞AGS中, RT-qPCR检测其转染效果, MTT检测细胞增殖, Transwell检测细胞迁移和侵袭, Western blot检测CyclinD1、p21、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2, MMP-2)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9, MMP-9)蛋白表达. 双荧光素酶报告实验验证lncRNA CCDC183-AS1与miR-1301-3p的靶向调控关系.

实验结果

胃癌组织中lncRNA CCDC183-AS1高表达, miR-1301-3p低表达. 抑制lncRNA CCDC183-AS1表达或高表达miR-1301-3p可降低AGS细胞OD值、迁移细胞数、侵袭细胞数以及CyclinD1、MMP-2、MMP-9表达水平, 提高p21表达水平. lncRNA CCDC183-AS1可靶向负调控miR-1301-3p表达,下调miR-1301-3p表达逆转了抑制lncRNA CCDC183-AS1表达对AGS细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用.

实验结论

胃癌组织中lncRNA CCDC183-AS1表达升高, 抑制lncRNA CCDC183-AS1表达可降低AGS细胞的增殖、迁移和侵袭能力, 其分子机制可能与靶向上调miR-1301-3p有关, 为胃癌的靶向分子治疗提供了新靶点.

展望前景

miR-1301-3p下游靶基因以及信号通路在胃癌进展中的作用还未知, 且本研究仅仅限于体外实验, 还需进一步验证lncRNA CCDC183-AS1/miR-1301-3p轴在裸鼠移植瘤实验中对胃癌进展的作用.