基础研究
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世界华人消化杂志. 2019-12-28; 27(24): 1473-1482
Published online 2019-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v27.i24.1473
麦冬皂苷D通过调控miR-519d-3p/EIF4E表达对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的实验研究
申鹏, 汪正飞
申鹏, 汪正飞, 衢州市人民医院肝胆外科 浙江省衢州市 324000
申鹏, 主治医师, 主要研究方向为肝胆胰疾病的诊治.
作者贡献分布: 此课题由申鹏设计; 研究过程由申鹏与汪正飞操作完成; 数据分析由申鹏与汪正飞完成; 本论文写作由申鹏与汪正飞完成.
通讯作者: 汪正飞, 副主任医师, 324000, 浙江省衢州市柯城区钟楼底2号, 衢州市人民医院肝胆外科. pazze3@163.com
收稿日期: 2019-11-13
修回日期: 2019-12-10
接受日期: 2019-12-20
在线出版日期: 2019-12-28
文章亮点
实验背景

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)易复发和转移, 缺乏有效的治疗药物. 麦冬皂苷D(ophiopogonin D, OPD)是中药麦冬提取物中重要的单体成分, 在乳腺癌、肺癌、黑素瘤等肿瘤中发挥抗癌作用, 但是对HCC的影响还未知. 本研究探讨OPD对HCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制, 以期为HCC治疗药物的研发提供新思路.

实验动机

本研究的主题是OPD是否抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭及其是否通过调控miR-519d-3p/真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic translation initiation factor 4E, EIF4E)轴表达发挥作用, 目的是为了探究OPD是否发挥抗HCC作用及其可能的作用机制.

实验目标

本研究的主要目标是探讨OPD是否具有抗HCC作用及作用机制, 通过实验明确了OPD可可能通过调控miR-519d-3p/EIF4E抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭, 接下来进一步通过动物模型实验进一步验证OPD的抗HCC作用, 可能为临床HCC治疗药物的研发提供新途径.

实验方法

本研究采用四甲基噻唑蓝染色法检测了细胞增殖, Transwell检测了细胞迁移和侵袭, 实时荧光定量PCR检测了细胞中miR-519d-3p和EIF4E mRNA表达, Western blot检测了细胞周期蛋白D1、p21、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)、MMP-9和EIF4E蛋白表达, 双荧光素酶报告基因实验验证了miR-519d-3p与EIF4E的3'端UTR能否靶向结合.

实验结果

本研究达到实验目标. 实验结果表明OPD可抑制HCC细胞增殖、迁移和侵袭, 在一定程度上发挥抗HCC作用, 同时, OPD通过调控上调miR-519d-3p表达, 进而抑制EIF4E表达来抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭.

实验结论

本研究首次发现OPD可抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭, 且其作用机制与调控miR-519d-3p/EIF4E轴表达有关. OPD可能具有开发为治疗HCC药物的潜在价值.

展望前景

本研究不足之处是还未进行动物相关实验, 仅在细胞层面进行了探讨, 接下来将通过动物实验探讨OPD对HCC小鼠肿瘤生长的影响及其他可能的作用机制. 方法是通过二乙基亚硝胺腹腔注射和CCl4灌胃方法构建小鼠HCC模型, 灌胃OPD, 探究OPD对肿瘤生长的影响, 以及建立接种miR-519d-3p过表达等HCC细胞建立移植瘤裸鼠, 探讨miR-519d-3p过表达对移植瘤裸鼠肿瘤生长的影响.