修回日期: 2019-04-25
接受日期: 2019-05-15
在线出版日期: 2019-06-08
肠黏膜屏障的损伤、免疫系统紊乱、肠道菌群失调可能是腹型过敏性紫癜(henoch-schonlein purpura, HSP)的重要发病机制之一, 然而对于免疫因子与肠黏膜屏障损伤的关系尚不清楚.
本研究主要探讨急性期腹型HSP患儿外周血及十二指肠黏膜中IL-17及其相关细胞因子的表达变化及其与肠道黏膜防御屏障(简称黏膜屏障)的关系, 拟明确全身及局部黏膜IL-17等免疫细胞因子在腹型HSP发病机制中的作用, 同时了解肠道菌群失调与腹型HSP的关系. 所获的结果将有可能为临床探索新的腹型HSP治疗策略提供一定的理论依据.
本研究旨在明确全身及局部黏膜IL-17等免疫细胞因子在腹型HSP发病机制中的作用, 同时了解肠道菌群失调与腹型HSP的关系. 本研究表明IL-17及其相关细胞因子可能介导全身性及肠黏膜局部的炎症反应, 肠道菌群失调则可能加重了IL-17的炎症反应, 与腹型HSP的发病及黏膜屏障损伤机制具有相关性. 进一步扩大样本及研究肠黏膜机械屏障的损伤情况, 分析肠道免疫屏障、生物屏障、机械屏障三者之间的相关性, 将有可能为本研究结论提供更有力的依据, 甚至为临床特异性免疫治疗及益生菌治疗腹型HSP提供更多依据.
本研究(1)采用了流式细胞术: 流式细胞术可以检测某种细胞的不同细胞亚群的百分比(比例). (2)ELISA检测: 操作简便、灵敏度高、特异性高, 可定量检测蛋白含量. (3)(RT-PCR): 特异性检测不同基因的表达情况, 可计算基因的相对表达量. (4)免疫组化法: 可对待测指标在组织中的表达进行定位检测, 通过软件可进行定量分析. (5)组织HE染色: 是观察组织病理学改变的常用方法. (6)细菌16S rDNA法: 特异度高, 可以定量检测待测细菌的含量.
本研究已达到预期的实验目标. 本研究结果主要发现了腹型HSP患儿表达Th17、Tc17细胞明显增高; 腹型HSP患儿外周血IL-17、IL-6、IL-23水平增高, IFN-γ水平无明显改变; 腹型HSP患儿十二指肠黏膜组织病变主要为非特异性慢性炎症, 部分可见血管炎性病变; 腹型HSP患儿十二指肠黏膜IL-17、IL-6、IFN-γ mRNA及蛋白表达水平均明显增高, IL-23mRNA及蛋白表达水平增高不明显; 腹型HSP患儿双歧杆菌数量、双歧杆菌/大肠杆菌(B/E)比值下降(P<0.05). 大肠杆菌数量无明显改变. 本研究结果提示了IL-17及其相关细胞因子通过介导全身性及肠黏膜局部的炎症反应, 肠道菌群失调则可能扩大了IL-17介导的炎症反应过程, 与腹型HSP的发病及黏膜屏障损伤机制密切相关. 可能为临床特异性免疫治疗和(或)及益生菌治疗腹型HSP提供一定的理论依据.
本研究发现Tc17细胞在腹型HSP患儿外周血中高表达; IL-17在腹型HSP患儿黏膜组织中高表达, 与外周血高表达趋势一致; IFN-γ在腹型HSP患儿黏膜组织中高表达. 可能与炎症部位的致病性Th17细胞(IFN-γ+IL-17+T细胞)产生IFN-γ有关.
在获取足够大的研究样本例数的基础上. 对不同指标间可能存在的作用关系进行更深的探索. 本研究未来研究的方向是: (1)完成肠黏膜机械屏障相关指标的研究. 进一步探讨肠道机械屏障、免疫屏障、生物屏障三者之间的关系. (2)研究IL-17及其相关细胞的表达水平与肠黏膜炎症程度是否存在相关性.