修回日期: 2023-06-10
接受日期: 2023-06-29
在线出版日期: 2023-07-08
结肠癌是临床上常见的一种恶性肿瘤, 有研究报道, 环状RNA(circular RNA, circRNA)参与结肠癌的发生发展. 其中, circSHKBP1作为癌基因促进癌症进展, 因此我们假设circSHKBP1也参与结肠癌的发展.
探讨circSHKBP1对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响及其可能作用机制.
选取本院2020-03/2020-07的69例结肠癌组织及癌旁组织标本, qRT-PCR检测circSHKBP1、miR-125a-5p的表达量; 体外培养人结肠癌细胞HT29, 随机分组: sh-NC组、sh-circSHKBP1组、miR-NC组、miR-125a-5p组、sh-circSHKBP1+anti-miR-NC组、sh-circSHKBP1+anti-miR-125a-5p组; 采用MTT法、平板克隆形成、和流式细胞术检测细胞增殖、克隆形成及凋亡; 采用双荧光素酶报告验证miR-125a-5p过表达对野生型(wild-type, WT)载体wt-circSHKBP1的荧光素酶活性; 采用Western blot检测b细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2, Bcl-2), Bcl-2相关X蛋白(BCL-2-associated X protein, Bax)蛋白表达.
在结肠癌组织中circSHKBP1的表达上调(P<0.05), miR-125a-5p的表达下降(P<0.05); 相对sh-NC组, 沉默circSHKBP1显著降低结肠癌细胞的增殖率、提高凋亡率和Bax的表达, 降低了细胞克隆形成数, 减少Bcl-2的表达(P<0.05); miR-125a-5p过表达可降低wt-circSHKBP1的荧光素酶活性(P<0.05); 与miR-NC组对照, miR-125a-5p组降低增殖率、提高凋亡率和Bax的表达, 减少细胞克隆形成数, 降低Bcl-2的表达(P<0.05); 相对sh-circSHKBP1+anti-miR-NC组, sh-circSHKBP1+anti-miR-125a-5p组提高了肿瘤细胞增殖率、降低了凋亡率和Bax的表达, 增加了细胞克隆形成数, 提高了Bcl-2的表达(P<0.05).
敲低circSHKBP1可通过靶向miR-125a-5p表达抑制结肠癌细胞增殖并促进细胞凋亡.
核心提要: 有研究报道, circSHKBP1可作为促癌基因参与癌症进展, 因此我们假设circSHKBP1也参与结肠癌的发展. 随后我们证实敲低circSHKBP1可通过靶向miR-125a-5p表达抑制结肠癌细胞增殖并促进细胞凋亡.