基础研究
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世界华人消化杂志. 2023-07-08; 31(13): 537-543
Published online 2023-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v31.i13.537
circSHKBP1通过靶向miR-125a-5p调控结肠癌细胞增殖和凋亡
杨廷旭, 薛蕊芳
杨廷旭, 薛蕊芳, 酒泉市人民医院全科医学科 甘肃省酒泉市 735000
杨廷旭, 硕士, 主任医师, 研究方向为中西医结合消化及消化内镜.
作者贡献分布: 此课题由杨廷旭及薛蕊芳设计; 研究过程杨廷旭操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由薛蕊芳提供; 数据分析由杨廷旭及薛蕊芳完成; 本论文写作由杨廷旭完成, 薛蕊芳检查.
通讯作者: 杨廷旭, 硕士, 主任医师, 735000, 甘肃省酒泉市肃州区龙腾路22号, 酒泉市人民医院全科医学科. txyang66@sina.com
收稿日期: 2023-05-19
修回日期: 2023-06-10
接受日期: 2023-06-29
在线出版日期: 2023-07-08
Abstract
背景

结肠癌是临床上常见的一种恶性肿瘤, 有研究报道, 环状RNA(circular RNA, circRNA)参与结肠癌的发生发展. 其中, circSHKBP1作为癌基因促进癌症进展, 因此我们假设circSHKBP1也参与结肠癌的发展.

目的

探讨circSHKBP1对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响及其可能作用机制.

方法

选取本院2020-03/2020-07的69例结肠癌组织及癌旁组织标本, qRT-PCR检测circSHKBP1、miR-125a-5p的表达量; 体外培养人结肠癌细胞HT29, 随机分组: sh-NC组、sh-circSHKBP1组、miR-NC组、miR-125a-5p组、sh-circSHKBP1+anti-miR-NC组、sh-circSHKBP1+anti-miR-125a-5p组; 采用MTT法、平板克隆形成、和流式细胞术检测细胞增殖、克隆形成及凋亡; 采用双荧光素酶报告验证miR-125a-5p过表达对野生型(wild-type, WT)载体wt-circSHKBP1的荧光素酶活性; 采用Western blot检测b细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2, Bcl-2), Bcl-2相关X蛋白(BCL-2-associated X protein, Bax)蛋白表达.

结果

在结肠癌组织中circSHKBP1的表达上调(P<0.05), miR-125a-5p的表达下降(P<0.05); 相对sh-NC组, 沉默circSHKBP1显著降低结肠癌细胞的增殖率、提高凋亡率和Bax的表达, 降低了细胞克隆形成数, 减少Bcl-2的表达(P<0.05); miR-125a-5p过表达可降低wt-circSHKBP1的荧光素酶活性(P<0.05); 与miR-NC组对照, miR-125a-5p组降低增殖率、提高凋亡率和Bax的表达, 减少细胞克隆形成数, 降低Bcl-2的表达(P<0.05); 相对sh-circSHKBP1+anti-miR-NC组, sh-circSHKBP1+anti-miR-125a-5p组提高了肿瘤细胞增殖率、降低了凋亡率和Bax的表达, 增加了细胞克隆形成数, 提高了Bcl-2的表达(P<0.05).

结论

敲低circSHKBP1可通过靶向miR-125a-5p表达抑制结肠癌细胞增殖并促进细胞凋亡.

Keywords: 结肠癌; circSHKBP1; miR-125a-5p; 细胞增殖; 凋亡

核心提要: 有研究报道, circSHKBP1可作为促癌基因参与癌症进展, 因此我们假设circSHKBP1也参与结肠癌的发展. 随后我们证实敲低circSHKBP1可通过靶向miR-125a-5p表达抑制结肠癌细胞增殖并促进细胞凋亡.