基础研究
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世界华人消化杂志. 2022-04-08; 30(7): 310-317
Published online 2022-04-08. doi: 10.11569/wcjd.v30.i7.310
Circ_VANGL1调控miR-493-5p/FXR1影响结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭
朱丽燕, 占路娟, 卢吉英
朱丽燕, 占路娟, 浙江衢化医院消化内科 浙江省衢州市 324000
朱丽燕, 主治医师, 本科, 研究方向为消化内科.
卢吉英, 金华市中心医院肛肠科 浙江省金华市 321099
作者贡献分布: 此课题由朱丽燕、占路娟、卢吉英设计; 研究过程由朱丽燕、占路娟、卢吉英操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由卢吉英提供; 数据分析由朱丽燕、占路娟完成; 本论文写作由朱丽燕完成.
通讯作者: 朱丽燕, 主治医师, 324000, 浙江省衢州市柯城区文昌路62号, 浙江衢化医院消化内科. z13819012404@163.com
收稿日期: 2021-12-17
修回日期: 2022-01-20
接受日期: 2022-03-26
在线出版日期: 2022-04-08
Abstract
背景

circRNA在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)组织、细胞系和血浆中异常表达, 与CRC临床恶性特征密切相关, 但CRC中环状RNA VANGL1(circular RNA VANGL1, circ_VANGL1)的表达及其功能机制仍不清楚. 假设circ_VANGL1通过微小RNA(microRNA, miR)-493-5p/脆性X相关基因1(fragile X-related gene 1, FXR1)轴影响CRC细胞的增殖、迁移和侵袭.

目的

探讨circ_VANGL1调控miR-493-5p/FXR1对CRC细胞增殖、迁移和侵袭的影响.

方法

Western blot检测FXR1在CRC组织和癌旁组织中表达. RT-qPCR检测circ_VANGL1和miR-493-5p表达. 体外培养CRC细胞Caco-2, 将其分为si-circ_VANGL1组、si-NC组、miR-NC组、miR-493-5p mimic组、si-circ_VANGL1+miR-493-5p Inhibitor组. 细胞计数试剂盒(cell counting kit-8, CCK-8)和克隆形成实验评估Caco-2增殖能力. Transwell实验评估Caco-2迁移和侵袭能力. 双荧光素酶报告实验检测RNAs(circ_VANGL1和miR-493-5p、miR-493-5p和FXR1)之间的相互作用.

结果

与癌旁组织比较, CRC组织中circ_VANGL1相对水平、FXR1蛋白表达显著升高(P<0.05), miR-493-5p相对水平显著降低(P<0.05). 与si-NC组比较, si-circ_VANGL1组Caco-2细胞抑制率、miR-493-5p相对水平显著升高(P<0.05), FXR1蛋白表达、克隆形成数、迁移数、侵袭数显著降低(P<0.05). 与miR-NC组比较, miR-493-5p mimic组Caco-2细胞抑制率显著升高(P<0.05), FXR1蛋白表达、克隆形成数、迁移数、侵袭数显著降低(P<0.05). circ_VANGL1直接与miR-493-5p结合. 与si-circ_VANGL1组比较, si-circ_VANGL1+miR-493-5p Inhibitor组Caco-2细胞抑制率显著降低(P<0.05), FXR1蛋白表达、克隆形成数、迁移数、侵袭数显著升高(P<0.05).

结论

沉默circ_VANGL1通过靶向miR-493-5p/FXR1轴抑制CRC细胞增殖、迁移和侵袭.

Keywords: circ_VANGL1; 结直肠癌; miR-493-5p; FXR1; 细胞增殖; 迁移; 侵袭

核心提要: 本研究首次揭示了CRC组织中circ_VANGL1相对水平升高, circ_VANGL1在CRC细胞增殖和转移中具有致癌作用, 沉默circ_VANGL1通过靶向miR-493-5p/FXR1轴抑制CRC细胞增殖、迁移和侵袭.