基础研究
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世界华人消化杂志. 2022-11-28; 30(22): 990-996
Published online 2022-11-28. doi: 10.11569/wcjd.v30.i22.990
下调IL-32γ表达降低自然杀伤细胞对食管癌细胞的杀伤作用
虞伟妃, 汪笑秋, 赵丽萍, 周珏伊, 冯继红
虞伟妃, 汪笑秋, 赵丽萍, 周珏伊, 冯继红, 浙江中医药大学研究生院 浙江省杭州市 310053
虞伟妃, 丽水市人民医院肿瘤放化疗科 浙江省丽水市 323000
虞伟妃, 主治医师, 研究方向为肿瘤内科化疗.
作者贡献分布: 此课题由虞伟妃及汪笑秋设计; 研究过程由虞伟妃、汪笑秋、赵丽萍及周珏伊操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由虞伟妃提供; 数据分析由虞伟妃、赵丽萍、周珏伊及冯继红完成; 论文写作由虞伟妃完成.
通讯作者: 虞伟妃, 主治医师, 323000, 浙江省丽水市大众街15号, 丽水市人民医院肿瘤放化疗科. yuweifei9623@tom.com
收稿日期: 2022-07-29
修回日期: 2022-08-21
接受日期: 2022-10-20
在线出版日期: 2022-11-28
Abstract
背景

白细胞介素(interleukin, IL)-32γ在食管癌中活化的自然杀伤(natural killer, NK)细胞中高表达, 但尚不清楚NK细胞中IL-32γ的表达水平是否影响其对食管癌细胞的杀伤作用.

目的

探讨IL-32γ在食管癌中对NK细胞的抗肿瘤作用的影响.

方法

将靶向IL-32γ的shRNA(shIL-32γ)转入NK-92细胞后, 将shIL-32γ转染的NK-92细胞分别与食管癌细胞EC9706和TE-1构成共培养体系. 收集食管癌细胞EC9706和TE-1, 用细胞计数试剂8(cell counting kit-8, CCK-8)测量细胞活性, 5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-Ethynyl-2'-deoxyuridine, EDU)检测细胞增殖, 流式细胞术检测细胞凋亡, Western blot检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2, Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X, Bax)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved cysteine-containing aspartate-specific proteases 3, Cleaved caspase 3)、肿瘤坏死因子受体超族成员6(tumor necrosis factor receptor superfamily member 6, FAS)、死亡受体3(death receptor 3, DR3)和肿瘤坏死因子受体2(tumor necrosis factor receptor 2, TNFR2)的表达.

结果

敲除NK-92细胞的IL-32γ后, 在共培养体系中, EC9706和TE-1细胞的细胞活性均升高(P<0.01), EDU阳性细胞数均增多, 细胞凋亡均降低(P<0.01), Bcl-2表达水平增加(P<0.01), Bax、Cleaved caspase 3、FAS、DR3和TNFR2的表达水平均降低(P<0.01).

结论

敲降IL-32γ能减弱NK-92细胞的抗食管癌作用, 且此作用可能与降低食管癌细胞中死亡受体表达和caspase-3激活有关.

Keywords: IL-32γ; 食管癌; 自然杀伤细胞

核心提要: 敲低自然杀伤细胞中白细胞介素-32γ表达能通过减弱食管癌细胞中死亡受体途径和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3激活来降低其对食管癌细胞的杀伤作用.