修回日期: 2022-07-22
接受日期: 2022-09-20
在线出版日期: 2022-09-28
溶瘤病毒作为治疗癌症的新手段, 具有疗效快, 靶向性强, 无细胞毒性等特点, H101作为商品化上市的溶瘤病毒表现出了稳定的抗癌特效, 为中晚期胃癌患者的腹膜转移治疗提供了可能.
探讨H101对胃癌细胞增殖、迁移、凋亡的调控作用及其相关机制研究.
将BGC-823和SGC-7901两种胃癌细胞系培养在6孔板中, 分别加入感染复数(multiplicity of infection, MOI)值为1、5、10、15的H101, 作用48 h后, 用MTS法检测细胞的存活率, 免疫印迹法(western blot, WB)检测腺病毒早期区1(adenovirus early region 1, E1A)的表达. 选取SGC-7901细胞, 用划痕法检测各组细胞48 h的迁移率, Hoechst33342染液, 观察H101作用48 h后凋亡小体的形成情况. Western blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达.
WB结果显示, H101中的EIA表达量比对照组更高, 差异具有统计学意义(P<0.05). MTS结果显示与MOI值为1时相比, MOI值为15的时候, H101在体外可以明显杀伤BGC-823和SGC-79012种胃癌肿瘤细胞(P<0.05). 在增殖实验中发现相对于BGC-823细胞, SGC-7901细胞对H101的敏感性更差, 因此选取敏感性相对较差的SGC-7901细胞作为研究重点. 48 h后, 与对照组和MOI = 1组的迁移距离相比, MOI = 5组, MOI = 10组和MOI = 15组的迁移距离明显更低, (P均<0.05). 与MOI = 1组相比, MOI = 5、MOI = 10和MOI = 15组的凋亡小体数量更多(P均<0.05), 与对照组和MOI = 1组相比, MOI = 5、MOI = 5和MOI = 10组的B淋巴细胞瘤-2蛋白(B-cell lymphoma-2, Bcl-2)表达量较低(P均<0.05), 而凋亡蛋白(BCL2-associated X, Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3, Caspase-3)表达量均更高(P均<0.05).
H101能够抑制胃癌细胞的增殖、迁移, 提高细胞凋亡相关蛋白的表达量, 加速细胞的凋亡.
核心提要: 溶瘤病毒在一定的感染复数(multiplicity of infection, MOI)值下, 通过影响Caspase信号通路的相关蛋白, 对胃癌细胞作用48 h能够有效抑制胃癌细胞的增值和转移, 并促进癌细胞的凋亡.