基础研究
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世界华人消化杂志. 2021-03-28; 29(6): 274-281
Published online 2021-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v29.i6.274
KLF5通过激活Wnt通路对HpSlyD诱导胃黏膜肠化生作用的影响
季永欣, 王春子, 李雪, 李莉
季永欣, 王春子, 李雪, 浙江中医药大学附属湖州中医院急诊科 浙江省湖州市 313000
季永欣, 主治医师, 研究方向为临床医学全科.
李莉, 浙江中医药大学附属湖州中医院消化科 浙江省湖州市 313000
基金项目: 2019年度湖州市科学技术项目(2019GY22).
作者贡献分布: 此课题由季永欣、王春子、李雪及李莉设计; 研究过程由季永欣、王春子、李雪及李莉操作完成; 数据分析由王春子、李雪及李莉完成; 本论文写作由季永欣完成.
通讯作者: 季永欣, 主治医师, 313000, 浙江省湖州市南街82号湖州市中医院急诊科. Fellowp19@126.com
收稿日期: 2021-01-06
修回日期: 2021-01-23
接受日期: 2021-03-02
在线出版日期: 2021-03-28
Abstract
背景

Krüppel样因子5(krüppel-like factor 5, KLF5)和Wnt/β-Catenin通路都是肿瘤发生的研究热点, 目前有研究发现KLF5与肠上皮细胞的分化和增殖有关, 推测其可能参与了肠化生的发生. 但目前有关KLF5对胃黏膜肠化生组织增殖、凋亡的影响及其分子机制的研究报道相对较少.

目的

分析KLF5通过激活Wnt通路对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H. pylori)诱导胃黏膜肠化生(gastric intestinal metaplasia, GIM)作用的影响.

方法

收集肠化生组织和正常胃黏膜, 采用RT-PCR法、Western blot法分别检测KLF5、Wnt3a mRNA和蛋白表达. 体外培养胃黏膜上皮细胞GES1, 分为空白对照组、HpSlyD组(200 ng/mL的HpSlyD+阴性序列)、干扰KLF5组(200 ng/mL的HpSlyD +KLF5 siRNA)、Wnt激动剂组(200 ng/mL的HpSlyD +KLF5 siRNA+氯化锂)、Wnt激动剂+干扰KLF5组. 采用MTT法、流式细胞仪分别检测各组GES1细胞增殖、凋亡情况, 采用RT-PCR法检测KLF5、Wnt3a、β-catenin、Villin 1, VIL1)、三叶因子Ⅱ(trefoil factor 2, TFF2)、尾侧同源盒因子2(caudal homeobox factor 2CDX2)mRNA表达. Western blot法检测VIL1、TFF2、CDX2蛋白表达.

结果

KLF5、Wnt3a mRNA和蛋白表达量在肠化生组织中明显高于在正常胃黏膜中的表达(P<0.01). HpSlyD组、干扰对照组细胞增殖率明显高于空白对照组、凋亡率明显低于空白对照组(P<0.05), 干扰KLF5组细胞增殖率明显低于HpSlyD组、凋亡率明显高于HpSlyD组(P<0.05). HpSlyD组、干扰对照组细胞VIL1、TFF2、CDX2 mRNA和蛋白表达明显高于空白对照组(P<0.05), 干扰KLF5组细胞VIL1、TFF2、CDX2 mRNA和蛋白表达明显低于HpSlyD组(P<0.05). 干扰KLF5组细胞Wnt3a、β-catenin、CDX2 mRNA表达明显低于HpSlyD组(P<0.05). 而Wnt激动剂+干扰KLF5组Wnt3a、β-catenin、CDX2 mRNA表达明显高于干扰KLF5组(P<0.05).

结论

干扰KLF5表达可显著抑制HpSlyD诱导的胃黏膜化生的发生, KLF5可能通过激活Wnt/β-Catenin促进HpSlyD诱导的胃黏膜化生, 为胃癌的临床预防提供了新的靶点.

Keywords: KLF5; Wnt通路; HpSlyD; 胃黏膜肠化生

核心提要: Krüppel样因子5(krüppel-like factor 5, KLF5)在肠化生组织中高表达, 沉默KLF5表达后肠化生相关蛋白表达水平受到抑制, Wnt/β-Catenin通路相关基因Wnt3a、β-catenin、CDX2也受到抑制, 进而抑制细胞增殖和促进细胞凋亡, 沉默KLF5表达可能是通过Wnt/β-Catenin通路来抑制肠化生的发生.