基础研究
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世界华人消化杂志. 2021-01-08; 29(1): 7-14
Published online 2021-01-08. doi: 10.11569/wcjd.v29.i1.7
LncRNA LINC01224/miR-513b-5p对结肠癌细胞SW1116增殖、迁移及侵袭的影响
张兆辉, 王利民
张兆辉, 王利民, 金华市中心医院肝胆胰外科 浙江省金华市 321000
张兆辉, 主治医师, 研究方向为肝胆胰和消化.
作者贡献分布: 此课题由张兆辉与王利民设计; 研究过程由张兆辉与王利民操作完成; 研究所用试剂由张兆辉提供; 数据分析由王利民完成; 本论文写作由张兆辉完成.
通讯作者: 张兆辉, 主治医师, 321000, 浙江省金华市婺城区明月街351号, 金华市中心医院肝胆胰外科. congzhuo19960515@163.com
收稿日期: 2020-10-29
修回日期: 2020-11-16
接受日期: 2020-11-26
在线出版日期: 2021-01-08
Abstract
背景

我国结肠癌发病率与死亡率逐年上升, 目前结肠癌的发病机制尚未阐明, LncRNA在结肠癌等肿瘤发生过程中可发挥重要调控作用, 其主要通过竞争性结合miRNA而发挥作用, 已知LncRNA LINC01224在肿瘤中可能发挥癌基因作用, 但LINC01224在结肠癌形成及发展过程中的作用机制尚未阐明.

目的

探讨LncRNA LINC01224/miR-513b-5p对结肠癌细胞SW1116增殖、迁移、侵袭的影响及其可能作用机制.

方法

采用qRT-PCR法检测癌旁组织与结肠癌组织中LINC01224、miR-513b-5p的表达量; si-NC、si-LINC01224、si-LINC01224与anti-miR-NC、si-LINC01224与anti-miR-513b-5p分别转染入人结肠癌细胞SW1116; 采用qRT-PCR法检测SW1116细胞中LINC01224、miR-513b-5p的表达量; 采用MTT实验检测细胞存活率; 应用流式细胞仪检测细胞周期; 采用Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭; 双荧光素酶报告实验检测LINC01224与miR-513b-5p的靶向关系; Western blot法检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量.

结果

与癌旁组织比较, 结肠癌组织中LINC01224的表达水平升高(P<0.05), miR-513b-5p的表达水平降低(P<0.05); 与si-NC组比较, si-LINC01224组细胞存活率降低(P<0.05), G0-G1期细胞比例升高(P<0.05), S期细胞比例降低(P<0.05), 迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05), E-cadherin蛋白水平升高(P<0.05), N-cadherin蛋白水平降低(P<0.05); 双荧光素酶报告实验证实LINC01224可靶向结合miR-513b-5p; 与si-LINC01224+anti-miR-NC组比较, si-LINC01224+anti-miR-513b-5p组细胞存活率升高(P<0.05), G0-G1期细胞比例降低(P<0.05), S期细胞比例升高(P<0.05), 迁移及侵袭细胞数增多(P<0.05), E-cadherin蛋白水平降低(P<0.05), N-cadherin蛋白水平升高(P<0.05).

结论

干扰LINC01224表达可通过上调miR-513b-5p而减弱结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭能力, 并可诱导细胞周期阻滞于G0-G1期.

Keywords: LncRNA LINC01224; miR-513b-5p; 结肠癌; 增殖; 迁移; 侵袭

核心提要: LINC01224在结肠癌中表达上调, 而miR-513b-5p则表达下调, LINC01224可吸附miR-513b-5p而负向调控miR-513b-5p的表达, 体外细胞实验证实干扰LINC01224表达可通过竞争性结合miR-513b-5p而调节结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期过程, LINC01224可能作为结肠癌治疗的潜在靶点, 可为阐明结肠癌的发病机制及其治疗提供新方向.