下调长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1表达对胃癌HGC-27细胞生长和顺铂敏感性的影响

Abstract

背景

胃癌(gastric cancer, GC)已成为威胁人类生命安全的恶性肿瘤之一, 目前GC发生及发展的分子机制尚未完全阐明, 长链非编码RNA(long-chain noncoding RNA, lncRNA)在肿瘤中异常表达并可能参与肿瘤发生及发展过程, 但仍有部分lncRNA在GC发生及转移过程中的调控作用尚未阐明.

目的

探讨lncRNA KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1 opposite strand/antisense transcript 1, KCNQ1OT1)对HGC-27细胞增殖、侵袭、迁移和顺铂敏感性的影响.

方法

将转染KCNQ1OT1-siRNA的HGC-27细胞作为KCNQ1OT1-siRNA组, 转染阴性对照的HGC-27细胞作为NC-siRNA组, 正常培养的细胞作为对照组. 顺铂处理KCNQ1OT1-siRNA组、NC-siRNA组细胞后, 采用细胞计数试剂盒法检测细胞活力并计算细胞的半数抑制浓度(half- maximal inhibitory concentration, IC50)值. 采用实时荧光定量聚合酶链式反应、Transwell小室、流式细胞仪和免疫印迹法分别检测KCNQ1OT1表达水平、细胞增殖活力、侵袭与迁移、周期分布和细胞中上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)、多药耐药关联蛋白1(multidrug resistance associated protein 1, MRP1)表达情况.

结果

与对照组比较, NC-siRNA组中各指标差异无统计学意义(P>0.05); 与对照组或NC-siRNA组比较, KCNQ1OT1-siRNA组细胞中KCNQ1OT1表达水平、细胞在S期与G2/M期所占百分比和细胞增殖、侵袭、迁移能力以及细胞中N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均明显降低, 而细胞在G0/G1期所占百分比和E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05); 与NC-siRNA组比较, KCNQ1OT1-siRNA组P-gp蛋白水平显著降低(P<0.05), MRP1蛋白水平显著升高(P<0.05), IC50值明显降低(P<0.05).

结论

下调KCNQ1OT1表达可抑制HGC-27细胞增殖、侵袭、迁移并增强细胞对顺铂的敏感性.

Keywords: 胃癌; 长链非编码RNA; KCNQ1重叠转录物1; 细胞增殖; 顺铂; 细胞凋亡

核心提要: 本研究首次证实KCNQ1OT1在胃癌(gastric cancer, GC)细胞中呈高表达, 抑制KCNQ1OT1表达可抑制GC细胞增殖、迁移及侵袭, 还可增强顺铂敏感性.