临床实践
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世界华人消化杂志. 2020-09-08; 28(17): 865-872
Published online 2020-09-08. doi: 10.11569/wcjd.v28.i17.865
circ_0001785与miR-330-5p在结直肠癌中的表达及其生物学意义
赵卫华, 马睿, 温学红, 刘娜, 胡建功, 王新峰, 马亮
赵卫华, 温学红, 刘娜, 天津市中医药大学第二附属医院检验科 天津市 300250
赵卫华, 主管技师, 执业医师, 研究方向为中医内科学, 肠道菌群, 临床检验诊断学.
马睿, 天津医科大学总医院精准医学实验室 天津市 300052
胡建功, 王新峰, 天津市中医药大学第二附属医院病理科 天津市 300250
马亮, 中日友好医院检验科 北京市 100029
作者贡献分布: 此课题由赵卫华、马睿、温学红、刘娜、胡建功、王新峰及马亮设计; 研究过程由赵卫华、温学红及刘娜操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由马睿提供; 数据分析由马睿与马亮完成; 本论文写作由赵卫华完成.
通讯作者: 马亮, 博士, 副研究员, 100029, 北京市朝阳区樱花东街2号, 中日友好医院检验科. wumeijiu19700718@163.com
收稿日期: 2020-06-28
修回日期: 2020-08-05
接受日期: 2020-08-14
在线出版日期: 2020-09-08
Abstract
背景

结直肠癌(colorectal cancer, CRC)发病机制尚未阐明, 环状RNA (circular RNA, circRNA)在CRC等肿瘤中表达异常并可调控细胞增殖、迁移及侵袭等生物学过程, 但关于其具体作用机制尚未完全阐明, 因而探寻新型circRNA分子并探究其可能作用机制对进一步揭示CRC发病机制具有重要意义.

目的

探讨circ_0001785与miR-330-5p在CRC中的表达及其生物学意义.

方法

采用qRT-PCR法检测CRC组织、癌旁组织中circ_0001785、miR-330-5p的表达量; 采用Pearson法检测CRC中circ_0001785与miR-330-5p的相关性; 根据circ_0001785、miR-330-5p表达量的平均值将患者分为circ_0001785高表达组41例、circ_0001785低表达组39例与miR-330-5p高表达组45例、miR-330-5p低表达组35例, 观察circ_0001785、miR-330-5p表达量与CRC患者临床病理参数的相关性; 体外培养人CRC细胞SW480, 分别将si-NC、si-circ_0001785、si-circ_0001785与anti-miR-NC、si-circ_0001785与anti-miR-330-5p转染至SW480细胞; 采用qRT-PCR法检测细胞中circ_0001785、miR-330-5p的表达量; 采用CCK-8法检测细胞增殖; Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭; 双荧光素酶报告实验检测circ_0001785与miR-330-5p的靶向关系; Western blot法检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量.

结果

circ_0001785在CRC组织及细胞系中表达水平显著升高(P<0.05), miR-330-5p的表达水平显著降低(P<0.05); circ_0001785与miR-330-5p呈负相关(r = -0.985, P<0.0001); circ_0001785、miR-330-5p表达量与分化程度、淋巴结转移及肿瘤分期密切相关(P<0.05); 与si-NC组比较, si-circ_0001785组细胞活力及MMP-2、MMP-9蛋白水平显著降低(P<0.05), 迁移及侵袭细胞数显著减少(P<0.05); 双荧光素酶报告实验证实circ_0001785可靶向结合miR-330-5p; 下调miR-330-5p表达可降低干扰circ_0001785表达对CRC细胞SW480增殖、迁移及侵袭的作用.

结论

circ_0001785在CRC中表达上调, 而miR-330-5p表达下调, 干扰circ_0001785表达可通过上调miR-330-5p的表达从而抑制CRC细胞增殖、迁移及侵袭.

Keywords: circ_0001785; miR-330-5p; 结直肠癌; 增殖; 迁移; 侵袭

核心提要: circ_0001785在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)中呈高表达, 干扰circ_0001785表达可通过靶向调控miR-330-5p而调控CRC细胞增殖、迁移及侵袭.