基础研究
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世界华人消化杂志. 2020-06-08; 28(11): 401-409
Published online 2020-06-08. doi: 10.11569/wcjd.v28.i11.401
lncRNA DCST1-AS1靶向miR-874-3p对直肠癌细胞增殖和凋亡的影响
颜王鑫, 戚晓哲, 孙跃胜, 林继徐, 周慧珍, 陈亮
颜王鑫, 戚晓哲, 林继徐, 周慧珍, 陈亮, 温州市人民医院结直肠肛门外科 浙江省温州市 325000
颜王鑫, 主治医师, 研究方向为结直肠肛门疾病.
孙跃胜, 温州市人民医院普外科 浙江省温州市 325000
作者贡献分布: 此课题由颜王鑫、戚晓哲、孙跃胜、林继徐、周慧珍及陈亮设计; 研究过程由孙跃胜、林继徐、周慧珍及陈亮操作完成; 研究所用新试剂和分析工具由戚晓哲提供; 数据分析由颜王鑫、戚晓哲及孙跃胜完成; 本论文写作由颜王鑫、戚晓哲、孙跃胜及林继徐完成.
通讯作者: 陈亮, 副主任医师, 325000, 浙江省温州市瓯海区古岸路299号, 温州市人民医院结直肠肛门外科. gechi19700512@163.com
收稿日期: 2020-03-04
修回日期: 2020-05-07
接受日期: 2020-05-14
在线出版日期: 2020-06-08
Abstract
背景

长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)在直肠癌(rectal cancer, RC)中异常表达并可能参与肿瘤发生及发展过程, lncRNA DCST1-AS1在肿瘤中表达上调, 但其在RC发生及发展过程中的作用机制尚未阐明, 假设lncRNA DCST1-AS1在RC细胞中表达水平升高, 并可能促进肿瘤发生及发展.

目的

研究lncRNA DCST1-AS1对RC细胞增殖、凋亡的影响和潜在的分子机制.

方法

实时荧光定量聚合酶链式反应检测30例RC组织和癌旁组织中lncRNA DCST1-AS1和miR-874-3p RNA的水平, 对RC SW1463细胞进行转染, 分为si-NC组、si-DCST1-AS1组、miR-NC组、miR-874-3p组、pcDNA组、pcDNA-DCST1-AS1组、si-DCST1-AS1+anti-miR-NC组和si-DCST1-AS1+anti-miR-874-3p组, MTT实验和流式细胞术分别检测各组SW1463细胞增殖光密度(optical density, OD)值和凋亡率, Western blot检测细胞中细胞周期蛋白1(CyclinD1)、p21、B淋巴细胞瘤-2 (B-cell lymphoma-2, Bcl-2)和Bcl-2相关蛋白(Bcl-2-associated X protein, Bax)表达, 双荧光素酶报告系统验证lncRNA DCST1-AS1和miR-874-3p的关系.

结果

与癌旁组织组相比, 在RC组织组中lncRNA DCST1-AS1的含量显著升高(P<0.05), miR-874-3p含量显著降低(P<0.05); 与对照si-NC和miR-NC组比较, si-DCST1-AS1组和miR-874-3p组RC SW1463细胞的OD值、CyclinD1和Bcl-2蛋白含量均降低, 细胞凋亡率、p21和Bax蛋白含量均升高; lncRNA DCST1-AS1靶向负调控miR-874-3p的表达; 与si-DCST1-AS1+anti-miR-NC组比较, si-DCST1-AS1+anti-miR-874-3p组SW1463细胞OD值、CyclinD1和Bcl-2蛋白含量升高, 细胞凋亡率、p21和Bax含量降低.

结论

lncRNA DCST1-AS1通过靶向miR-874-3p调控RC SW1463细胞增殖和凋亡, lncRNA DCST1-AS1可能是RC潜在的分子靶点.

Keywords: 直肠癌; lncRNA DCST1-AS1; miR-874-3p; 增殖; 凋亡

核心提要: 长链非编码RNA DCST1-AS1在直肠癌组织及细胞中表达上调, 并可促进细胞增殖及抑制细胞凋亡, 其作用机制可能是通过靶向调控miR-874-3p的表达而发挥作用.