基础研究
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世界华人消化杂志. 2020-05-28; 28(10): 362-370
Published online 2020-05-28. doi: 10.11569/wcjd.v28.i10.362
miR-10b通过抑制KLF4表达诱导胃癌细胞对顺铂耐药
易弼顺, 马柏强, 李冰震, 田锋
易弼顺, 马柏强, 李冰震, 田锋, 丽水市人民医院创伤/急腹症、疝外科 浙江省丽水市 323000
易弼顺, 住院医师, 主要从事胃癌的诊断与治疗.
作者贡献分布: 此课题由易弼顺和马柏强设计; 研究过程由易弼顺与马柏强操作完成; 研究所用试剂及分析工具由易弼顺与李冰震提供; 数据分析由李冰震与田锋完成; 本论文写作由易弼顺完成.
通讯作者: 易弼顺, 住院医师, 323000, 浙江省丽水市莲都区大众街15号, 丽水市人民医院创伤/急腹症、疝外科. yibishun855@163.com
收稿日期: 2020-03-20
修回日期: 2020-04-22
接受日期: 2020-04-27
在线出版日期: 2020-05-28
Abstract
背景

胃癌(gastric cancer, GC)化疗容易产生获得性化疗耐药. miR-10b能参与调节食管癌和鼻咽癌细胞顺铂(cisplatin, DDP)耐药, 而在GC中其与DDP化疗敏感性的关系并不清楚.

目的

探讨miR-10b是否参与GC细胞对DDP耐药, 以及其中的分子机制.

方法

采用DDP反复刺激SGC-7901和MGC-803细胞并浓度递增法构建SGC-7901/DDP和MGC-803/DDP细胞. 检测SGC-7901/DDP和MGC-803/DDP细胞中miR-10b和KLF4的表达. 对SGC-7901和MGC-803细胞转染慢病毒携带的miR-10b过表达载体, MTT法检测miR-10b过表达对DDP敏感性的影响; Annexin V-FITC/PI染色法检测miR-10b过表达对DDP诱导的细胞凋亡的影响; RT-qPCR和Western blot检测miR-10b过表达对KLF4 mRNA和蛋白表达的影响. 进一步构建异体移植瘤模型, 并给予DDP化疗后, 宏观观察瘤体形态并称量瘤体质量. 对SGC-7901和MGC-803细胞共转染miR-10b和KLF4后, MTT法检测细胞对DDP敏感性变化.

结果

与SGC-7901和MGC-803细胞比较, SGC-7901/DDP和MGC-803/DDP细胞中miR-10b表达水平显著增加(P<0.01), KLF4 mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.01). 体外实验显示, 过表达miR-10b促进GC细胞对DDP耐药, 抑制KLF4 表达(P<0.01); 在体实验显示, DDP治疗后, miR-10b组瘤体质量显著高于NC组(P<0.01). 过表达KLF4能部分逆转过表达miR-10b诱导的GC细胞对DDP耐药.

结论

miR-10b通过抑制KLF4表达促进GC细胞DDP化疗耐药, 而miR-10b高表达产生的DDP耐药性可以被上调KLF4解除.

Keywords: miR-10b; KLF4; 顺铂; 胃癌; 耐药性; 细胞凋亡; 细胞活力

核心提要: miR-10b在胃癌(gastric cancer, GC)顺铂(cisplatin, DDP)耐药细胞中高表达. 上调miR-10b能通过抑制KLF4表达来促进GC细胞对DDP耐药, 而上调KLF4能部分逆转miR-10b过表达导致GC细胞DDP耐药.