修回日期: 2019-03-26
接受日期: 2019-04-16
在线出版日期: 2019-05-08
结肠癌是严重威胁人类生命健康的常见病. 近年来, 结肠癌的发病率呈明显上升趋势, 其复发转移及化疗耐药则是影响结直肠癌患者长期生存的首要障碍, 越来越多的研究提示表明miRNA参与了结肠癌的发病与耐药.
探讨miR-20b在结肠癌细胞耐药中的作用, 并对其机制进行了研究.
通过细胞活性实验确认了普通结肠癌细胞(SW480)与耐药细胞(SW480/5-FU)对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)的耐药性. 通过逆转录实验, 检测SW480/5-FU细胞中miR-20b的表达水平. 根据结果对SW480/5-FU细胞转染转入外源性miR-20b, 观察其耐药性, 转染和侵袭能力. 最后我们通过免疫印迹法检测了几种Janus激酶/信号转导与转录激活子(janus kinase/signal transducer and activator of tran-ions, JAK/STAT)信号通路在其中的变化.
在细胞活性实验中, 相比于SW480, SW480/5-FU表现出对5-FU明显的耐药性. 在逆转录实验中, SW480/5-FU细胞中miR-20b表达水平明显下调, 将外源性miR-20b转染入SW480/5-FU细胞中后, 其耐药性明显下降, 并且其转染和侵袭能力明显下降. 免疫印迹法实验显示, 转染miR-20b后的SW480/5-FU细胞络氨酸激酶(janus kinase, JAK)与转录因子(signal transducers and activators of transcription, STAT)磷酸化比例下调, JAK/STAT3信号通路被抑制.
SW480/5-FU对5-FU的耐药性可由miR-20b介导, 其机制可能与JAK-STAT信号通路表达下调相关.
核心提要: 结肠癌的复发转移及化疗耐药直接影响结直肠癌患者寿命, 越来越多的研究提示miRNA参与了结肠癌的耐药过程. 在本研究中, 我们对miR-20b在结肠癌细胞耐药中的作用进行了探讨. 相比于普通结肠癌细胞, 耐药细胞系细胞中miR-20b表达水平明显下调. 我们的结果表明耐药细胞系细胞对5-氟尿嘧啶的耐药性可由miR-20b介导, 其机制与Janus激酶/信号转导与转录激活子信号通路表达下调相关.