基础研究
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世界华人消化杂志. 2019-02-08; 27(3): 146-153
Published online 2019-02-08. doi: 10.11569/wcjd.v27.i3.146
七氟醚通过上调miR-34a抑制结直肠癌细胞的迁移和侵袭的机制研究
单晓山, 刘宇, 楼群兵, 周振峰
单晓山, 刘宇, 楼群兵, 义乌市中心医院麻醉科 浙江省义乌市 322000
单晓山, 住院医师, 主要从事麻醉方面的研究方向.
周振峰, 浙江省人民医院麻醉科 浙江省杭州市 310014
作者贡献分布: 此课题由单晓山与楼群兵设计; 研究过程由单晓山与刘宇操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由周振峰提供; 数据分析由刘宇与周振峰完成; 本论文写作由单晓山、刘宇及楼群兵完成.
通讯作者: 单晓山, 住院医师, 322000, 浙江省义乌市江东中路699号, 义乌市中心医院麻醉科. sygm163@163.com
电话: 0579-85209661
收稿日期: 2018-11-08
修回日期: 2018-12-24
接受日期: 2019-01-10
在线出版日期: 2019-02-08
Abstract
目的

研究七氟醚对人结直肠癌HCT116细胞迁移和侵袭能力的影响, 并探讨其分子机制.

方法

以细胞计数法(CCK-8)检测七氟醚对HCT116细胞增殖能力的影响; 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-34a表达水平, Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力, 蛋白免疫吸附法(Western blot)检测细胞中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloprotease, MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平.

结果

通过CCK-8实验筛选出七氟醚的作用浓度为4%. 以4%七氟醚处理HCT116细胞4 h后miR-34a表达水平升高了79%. 转染miR-34a inhibitor后, 细胞中miR-34a的表达水平下降了81%. 七氟醚干预后迁移细胞数由(97.75±16.10)降低到(36.60±8.58), 侵袭细胞数由(64.22±6.25)降低到(26.48±3.10), MMP-2蛋白表达水平由(0.68±0.11)下调到(0.24±0.04), MMP-9蛋白表达水平由(0.48±0.07)下调到(0.13±0.02); 而抑制miR-34a的表达后, 迁移细胞数由(40.15±9.02)提高到(88.65±12.74), 侵袭细胞数由(26.12±3.02)提高到(59.24±4.68), MMP-2蛋白表达水平由(0.22±0.03)上调到(0.61±0.09), MMP-9蛋白表达水平由(0.14±0.03)上调到(0.43±0.06).

结论

七氟醚通过上调miR-34a的表达抑制人结直肠癌HCT116细胞的迁移和侵袭, 可能与下调MMP-2和MMP-9蛋白表达有关.

Keywords: 七氟醚; miR-34a; 人结直肠癌HCT116细胞; 迁移; 侵袭

核心提要: 七氟醚通过上调miR-34a的表达抑制人结直肠癌HCT116细胞增殖、侵袭和迁移, 而转染miR-34a inhibitor后逆转了七氟醚对HCT116细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用, 该过程可能与调控MMP-2和MMP-9蛋白表达水平有关.