基础研究
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世界华人消化杂志. 2019-12-08; 27(23): 1419-1426
Published online 2019-12-08. doi: 10.11569/wcjd.v27.i23.1419
miR-10a-5p敲低通过靶向THBS2抑制胃癌细胞的生长和转移
任玲玲, 王立明, 朱雅碧
任玲玲, 王立明, 朱雅碧, 丽水市人民医院消化内科 浙江省丽水市 323000
任玲玲, 主治医师, 主要从事消化肿瘤方面的基础与临床研究.
作者贡献分布: 此课题由任玲玲与王立明设计; 研究过程由任玲玲与朱雅碧操作完成; 研究所用试剂由任玲玲与王立明提供; 数据分析由王立明完成; 本论文写作由任玲玲完成.
通讯作者: 任玲玲, 主治医师, 323000, 浙江省丽水市莲都区大众街15号, 丽水市人民医院消化内科. zhangyanhhuug@163.com
电话: 0578-2780124
收稿日期: 2019-09-29
修回日期: 2019-11-14
接受日期: 2019-11-24
在线出版日期: 2019-12-08
Abstract
背景

在胃癌(gastric cancer, GC)的发病和进展中, 已经发现许多miRNAs可发挥抑癌或促癌的作用. 但miRNAs数量众多, 在GC中仍有众多miRNAs的作用并不明确, 因此, 继续筛选具有影响GC细胞生长和转移的miRNAs仍十分必要.

目的

探究miR-10a-5p对GC细胞生长和转移的影响及其机制.

方法

采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, RT-qPCR)检测GC组织和GC细胞(MGC-803和AGS)中miR-10a-5p表达; miR-10a-5p-inhibitor转染入MGC-803和AGS细胞, CCK-8实验, 集落形成实验和Transwell实验分别检测细胞的增殖, 集落形成, 迁移和侵袭. 采用Western-blot和RT-qPCR检测GC组织和GC细胞(MGC-803和AGS)中THBS2表达; 采用TargetScan在线软件筛选miR-10a-5p的潜在靶基因THBS2, 并进一步验证. NC+pcDNA-Con, miR-10a-5p-inhibitor+pcDNA-Con和miR-10a-5p-inhibitor+pcDNA-THBS2共转染入MGC-803细胞, CCK-8实验, 集落形成实验和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖, 集落形成, 迁移和侵袭.

结果

miR-10a-5p在GC组织, MGC-803和AGS细胞中表达异常上调; miR-10a-5p敲低显著降低了MGC-803和AGS细胞的增殖, 集落形成和侵袭. THBS2 mRNA和蛋白水平在GC组织、MGC-803和AGS细胞中表达均异常下调; THBS2是miR-10a-5p的靶基因; 过表达THBS2能逆转miR-10a-5p敲低对MGC-803细胞增殖, 集落形成, 迁移和侵袭的抑制作用.

结论

miR-10a-5p敲低通过靶基因THBS2来抑制GC细胞的生长和转移.

Keywords: miR-10a-5p; THBS2; 胃癌; 增殖; 侵袭

核心提要: miR-10a-5p在胃癌中高表达. miR-10a-5p敲低通过靶向THBS2抑制MGC-803和AGS细胞的增殖, 集落形成, 迁移和侵袭.