基础研究
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世界华人消化杂志. 2019-09-28; 27(18): 1125-1132
Published online 2019-09-28. doi: 10.11569/wcjd.v27.i18.1125
内脏高敏感小鼠肠道树突状细胞异常活化与PDIA3/STAT3的相关性研究
马陈皋, 毛立祺, 应笑, 王爽爽, 李蒙, 张璐, 王曦, 吕宾
马陈皋, 毛立祺, 应笑, 王爽爽, 李蒙, 张璐, 王曦, 吕宾, 浙江中医药大学附属第一医院消化内科, 浙江省消化系统疾病病理生理重点实验室 浙江省杭州市 310006
马陈皋, 主要从事消化系统疾病的研究.
基金项目: 国家自然科学基金, Nos. 81600426, 81770535; 浙江省医药卫生科技计划项目, No. 2019RC229.
作者贡献分布: 此课题由吕宾、张璐、李蒙设计; 实验操作由王曦指导; 研究过程由马陈皋、毛立祺、王爽爽及应笑操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由吕宾提供; 数据分析由马陈皋与毛立祺完成; 本论文写作由吕宾与马陈皋完成.
通讯作者: 吕宾, 教授, 主任医师, 310053, 浙江省杭州市上城区邮电路54号, 浙江中医药大学附属第一医院消化内科. lvbin@medmail.com.cn
电话: 0571-87068001
收稿日期: 2019-08-02
修回日期: 2019-09-06
接受日期: 2019-09-14
在线出版日期: 2019-09-28
Abstract
背景

内脏高敏感的发生与肠系膜淋巴结树突状细胞(mesenteric lymph node dendritic cells, MLNDC)的异常活化相关; 蛋白质二硫键异构酶A3(protein disulfide isomerase A3, PDIA3)可以调节信号转导与转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3, STAT3)通路的活性. 我们假设, 在MLNDC中, PDIA3可以抑制STAT3通路, 激活MLNDC, 并最终引起内脏高敏感.

目的

初步探讨PDIA3/STAT3在内脏高敏感小鼠肠道树突状细胞异常免疫活化中的可能作用

方法

40只C57BL/6小鼠随机分成对照组(20只)和模型组(20只), 采用束缚应激建立小鼠肠易激综合征内脏高敏感模型, 用腹部撤回反射评估小鼠肠道敏感性, 磁珠分选技术分离两组小鼠MLNDC, 流式检测分选纯度以及比较两组MLNDC表面主要组织相容性复合体Ⅱ(major histocompatibility complex II, MHC-II)类分子的表达情况, 蛋白印记技术和免疫荧光技术比较两组MLNDC中PDIA3和磷酸化-信号转导与转录激活因子3(phosphorylated signal transduction and activator of transcription 3, P-STAT3)的表达及分布情况, 混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction, MLR)比较两组DC对初始T淋巴细胞的激活能力.

结果

模型组小鼠结肠扩张容量阈值明显低于对照组[(0.53 mL±0.07 mL)vs(0.85 mL±0.12 mL), t = -10.845, P = 0.000]; 流式检测磁珠分选所得的小鼠树突状细胞特异性抗原CD11c阳性MLNDC为86.61%±7.02%; 模型组MLNDC表面MHC-Ⅱ类分子表达显著高于对照组[(73.08%±2.64%)vs(53.20%±4.50%), t = - 7.617, P = 0.000]; 与对照组相比, 模型组小鼠MLNDC表达PDIA3明显升高[(0.77±0.04)vs(0.42±0.03), t = 11.086, P = 0.000], 同时P-STAT3的表达明显下降[(0.73±0.03)vs(1.24±0.18), t = -4.737, P = 0.038)], MLR中刺激初始T淋巴细胞增殖的能力明显增强[(34.24%±2.95%)vs(17.22%±3.47%), t = 6.472, P = 0.003].

结论

内脏高敏感小鼠MLNDC的异常免疫活化或许和PDIA3/STAT3有关.

Keywords: 肠易激综合征; 蛋白质二硫键异构酶A3; 信号转导与转录激活因子3; 肠道高敏感

核心提要: 本研究通过对比模型组和对照组实验动物肠系膜淋巴结树突状细胞(mesenteric lymph node dendritic cells, MLNDC)的活性差异、蛋白质二硫键异构酶A3(protein disulfide isomerase A3, PDIA3)和磷酸化-信号转导与转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3, STAT3)的表达差异, 提示内脏高敏感的发生或许和PDIA3对STAT3通路的抑制所引起的MLNDC的异常免疫活化有关.