基础研究
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世界华人消化杂志. 2019-08-08; 27(15): 927-935
Published online 2019-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v27.i15.927
miR-181a-5p靶向PIAS1对雨蛙肽诱导的急性胰腺炎腺泡细胞损伤的影响
王晓华, 陈铁江, 楼一波
王晓华, 陈铁江, 楼一波, 义乌市中心医院急诊科 浙江省义乌市 322000
王晓华, 副主任医师, 主要从事急诊科方面的疾病.
作者贡献分布: 此课题由王晓华与楼一波设计; 研究过程、数据分析及论文写作均由王晓华、陈铁江及楼一波完成; 研究所用新试剂及分析工具由陈铁江提供.
通讯作者: 王晓华, 副主任医师, 322000, 浙江省义乌市江东路699号, 义乌市中心医院急诊科. pbz4185511du@163.com
电话: 0579-85209666
收稿日期: 2019-05-21
修回日期: 2019-07-26
接受日期: 2019-07-26
在线出版日期: 2019-08-08
Abstract
背景

急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)引起的急性炎症对人们健康的危害性极大, 严重时会危及生命. 其发病机制复杂, 尚未完全清楚, 研究发现miRNA参与了AP的发病过程. 研究发现miR-181a-5p可抑制癌细胞迁移、侵袭和血管生成; miR-181a-5p还能抑制胃癌细胞增殖、侵袭, 转移和上皮间充质转化. 抑制miR-181a-5p表达可通过负向靶向INPP5A抑制细胞增殖和侵袭, 增强宫颈癌细胞凋亡. miR-181a可抑制胰腺癌细胞系的生长、减少迁移, 增加凋亡. 但miR-181a-5p在AP的增殖凋亡中的影响及作用机制尚不清楚.

目的

研究miR-181a-5p对AP腺泡细胞损伤的影响及潜在的作用机制.

方法

用100 nmol/L的雨蛙肽处理大鼠胰腺腺泡AR42J和MPC-83构建AP模型, 设置Con组、Caerulein组、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-181a-5p组(转染miR-181a-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-181a-5p组(转染anti-miR-181a-5p)、Caerulein+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC后进行Caerulein处理)、Caerulein+anti-miR-181a-5p组(转染anti-miR-181a-5p后进行Caerulein处)、Caerulein+pcDNA组(转染pcDNA后进行Caerulein处理)、Caerulein+pcDNA-PIAS1组(转染pcDNA-PIAS1后进行Caerulein处理)、Caerulein+anti-miR-181a-5p+si-NC组(anti-miR-181a-5p和si-NC共转染后进行Caerulein处理)、Caerulein+anti-miR-181a-5p+si-PIAS1组(anti-miR-181a-5p和si-PIAS1共转染后进行Caerulein处理), 用脂质体法转染至AR42J和MPC-83细胞. 酶联免疫吸附试验法检测雨蛙肽处理AR42J和MPC-83细胞的TNF-α和IL-6的表达; qRT-PCR检测AR42J和MPC-83细胞中miR-181a-5p、PIAS1 mRNA的表达水平; Western Blot检测蛋白表达; 流式细胞术检测细胞凋亡; 双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性.

结果

雨蛙肽处理AR42J和MPC-83细胞后, TNF-α和IL-6的表达显著升高; miR-181a-5p的表达水平显著升高; PIAS1 mRNA和蛋白的表达水平显著降低. miR-181a-5p抑制表达和PIAS1过表达抑制TNF-α和IL-6的表达, 抑制细胞凋亡. miR-181a-5p靶向负调控PIAS1; 抑制PIAS1表达逆转了抑制miR-181a-5p对雨蛙肽处理AR42J和MPC-83细胞的凋亡抑制作用.

结论

抑制miR-181a-5p表达可以抑制雨蛙肽诱导的AP腺泡细胞损伤, 其机制可能与靶向调控PIAS1有关. 可为AP诊断和治疗提供新靶点和新思路.

Keywords: miR-181a-5p; PIAS1; 雨蛙肽; 急性胰腺炎; 凋亡

核心提要: 抑制miR-181a-5p表达可以抑制雨蛙肽诱导的急性胰腺炎腺泡细胞损伤, 其机制可能与靶向调控PIAS1有关. 可为急性胰腺炎诊断和治疗提供新靶点和新思路.