基础研究
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世界华人消化杂志. 2018-01-18; 26(2): 71-79
Published online 2018-01-18. doi: 10.11569/wcjd.v26.i2.71
miR-223-3p靶向上皮细胞转化序列2基因调控胃癌细胞周期和凋亡的相关性研究
李伦, 兴成娟, 丛玲, 万义增
李伦, 兴成娟, 丛玲, 万义增, 锦州医科大学附属第三医院病理科 辽宁省锦州市 121000
李伦, 技师, 主要从事胃肠道肿瘤发生发展机制的研究.
作者贡献分布: 万义增负责科研设计与技术指导; 李伦负责分子生物学实验和文章写作; 兴成娟负责分子生物学实验与生物信息学分析; 丛玲负责分子生物学实验与统计分析.
通讯作者: 万义增, 教授, 121000, 辽宁省锦州市凌河区和平路五段2号, 锦州医科大学附属第三医院病理科. wanyz@lnmu.edu.cn
电话: 0416-3999090
收稿日期: 2017-11-16
修回日期: 2017-12-04
接受日期: 2017-12-12
在线出版日期: 2018-01-18
Abstract
目的

探讨miRNA-223-3p和上皮细胞转化序列2基因(epithelial cell transforming sequence 2 oncogene, ECT2)在胃癌(gastric cancer, GC)细胞周期和凋亡中的作用和机制, 并探讨其与GC临床病理因素的相关性及临床意义.

方法

首先采用实时荧光聚合酶链反应法(real-time polymerase chain reaction, RT-PCR)和蛋白质印迹法检测正常胃黏膜(GSE-1)和GC细胞(SGC-7901, BGC-823)中ECT2和miR-223-3p的表达水平; 其次, 采用免疫组织化学RT-PCR法检测80例GC患者的癌组织及相应的癌旁组织(距癌组织边缘>5 cm)中ECT2和miR-223-3p的表达情况; miR-223-3p抑制物和模拟物转染SGC-7901细胞, RT-PCR和Western blot检测转染后miR-223-3p和ECT2的表达. 最后用流式细胞仪检测转染后细胞周期和凋亡的变化.

结果

与正常胃黏膜细胞相比, GC细胞中ECT2和miR-223-3p的表达水平均明显升高(P<0.05); 免疫组织化学和RT-PCR结果显示, GC组织中ECT2阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05); 两者表达均与GC的分化程度、Lauren分型相关(P<0.05), 与TNM分期密切相关(P<0.01), 与患者的性别、年龄、肿瘤直径、Bormann分型无明显相关(P>0.05); 两者之间表达呈显著正相关(P<0.05); 将miR-223-3p类似物转染SGC-7901细胞后ECT2表达上调, 转染抑制剂后ECT2表达下调. miR-223-3p抑制物促使肿瘤细胞的G1期阻滞和促进凋亡作用.

结论

miR-223-3p是一种与GC细胞周期和凋亡密切相关的miRNA分子, 他可以通过影响ECT2的表达来调节GC细胞的细胞周期和凋亡; 两者可以作为反映GC生物学行为的有效指标.

Keywords: 胃癌; 上皮细胞转化序列2基因; miR-223-3p; 细胞周期; 凋亡

核心提要: 胃癌(gastric cancer, GC)死亡率高, 研究表明miRNA在其中起重要调控作用, 但具体机制仍不明确. ECT2是与细胞增殖和凋亡相关的基因, 在多种恶性肿瘤中高表达. 本文分析ECT2同miR-223-3p在GC恶性增殖中的相互作用, 为进一步明晰GC发展机制提供思路.