基础研究
Copyright ©The Author(s) 2017. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2017-11-08; 25(31): 2782-2790
Published online 2017-11-08. doi: 10.11569/wcjd.v25.i31.2782
HBV S编码链的反基因锁核酸对转基因小鼠体内病毒复制与表达的影响
肖树荣, 许桂丹, 韦武均, 彭彬, 邓益斌
肖树荣, 许桂丹, 韦武均, 彭彬, 邓益斌, 右江民族医学院附属医院医学检验中心 广西壮族自治区百色市 533000
肖树荣, 在读硕士, 主要从事肝脏病的基因诊断与治疗.
作者贡献分布: 此课题由邓益斌设计; 研究过程由肖树荣与许桂丹共同完成; 数据分析由韦武均完成; 论文写作由肖树荣与彭彬完成; 邓益斌提出修改意见.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81460123; 广西壮族自治区研究生创新计划项目, No. 201601005.
通讯作者: 邓益斌, 教授, 533000, 广西壮族自治区百色市中山二路18号, 右江民族医学院附属医院医学检验中心. enbin0776@sina.com
电话: 0776-2852592
收稿日期: 2017-09-06
修回日期: 2017-09-25
接受日期: 2017-10-17
在线出版日期: 2017-11-08
Abstract
目的

探讨针对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)S编码链的反基因锁核酸(anti-gene-locked nucleic acid, Anti-G-LNA)在转基因小鼠体内的抗病毒效果.

方法

将30只HBV转基因小鼠随机分为5组(n = 6), 分别为空白对照组(Control)(5%GLU+脂质体)、无关序列对照组(USQ)、拉米夫定对照组(LAM)、反义锁核酸对照组(Anti-S-LNA)、反基因锁核酸组(Anti-G-LNA). 拉米夫定组用灌胃法; 锁核酸经尾静脉注入小鼠体内. 采用实时荧光定量PCR检测血清乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA); 酶联免疫法检测血清乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen, HBsAg); 逆转录PCR检测肝脏乙型肝炎病毒S基因mRNA(HBV S mRNA)水平; 免疫组织化学检测肝细胞HBsAg水平.

结果

治疗后的第3、5、7天, 反基因锁核酸对HBV DNA抑制率分别为37.18%、50.27%、61.46%, HBsAg抑制率分别为30.17%、44.00%、57.76%, 与给药前比较有统计学意义(P<0.05), 与各对照组比较, 差异均有统计学意义(P<0.05). HBV S基因mRNA的相对表达量为0.33、肝细胞HBsAg阳性细胞率为31%, 与对照组相比有统计学意义(P<0.05); 肝肾功能检查和组织HE染色未发现异常改变.

结论

针对HBV S编码链设计的反基因锁核酸在转基因小鼠体内具有较好的抗病毒效果, 为HBV基因治疗提供理论依据和实验基础.

Keywords: 乙型肝炎病毒; 锁核酸; 反基因治疗; 乙型肝炎

核心提要: 反基因治疗是在DNA复制水平上的一种治疗策略, 其机制是由外源特定寡聚脱氧核苷酸与病毒双链DNA的特定区域专一性结合, 形成三链DNA分子, 从而阻断靶基因的转录与复制, 实现"反基因"之目的.