基础研究
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世界华人消化杂志. 2017-01-28; 25(3): 220-226
Published online 2017-01-28. doi: 10.11569/wcjd.v25.i3.220
过表达KLF17对结直肠癌细胞SW480上皮-间质转化和体外侵袭能力的影响
彭晶晶, 孟庆彬, 肖新波, 陈华涛, 赵春翔, 瞿紫微
彭晶晶, 长江航运总医院消化内科 湖北省武汉市 430015
孟庆彬, 肖新波, 陈华涛, 赵春翔, 瞿紫微, 武汉市第一医院胃肠外科 湖北省武汉市 430022
彭晶晶, 主治医师, 主要从事消化系肿瘤疾病的治疗与临床基础研究.
作者贡献分布: 此课题由瞿紫微、彭晶晶及孟庆彬设计; 研究过程由彭晶晶、孟庆彬、肖新波、陈华涛、赵春翔及孟庆彬操作完成; 数据分析由彭晶晶、瞿紫微及肖新波完成; 本论文写作由彭晶晶、孟庆彬及瞿紫微完成.
基金项目: 湖北省卫生计生委科研基金资助项目, No. WJ2015Z063; 武汉市卫生计生委科研基金资助项目, No. WX16C39; 湖北省自然科学基金一般面上基金资助项目, No. 2016CFB595.
通讯作者: 瞿紫微, 副主任医师, 430022, 湖北省武汉市硚口区中山大道215号, 武汉市第一医院胃肠外科. quziwei007@126.com
电话: 027-85332695
收稿日期: 2016-11-09
修回日期: 2016-11-27
接受日期: 2016-12-05
在线出版日期: 2017-01-28
Abstract
目的

研究KLF17基因转染对人结直肠癌细胞株SW480上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)和体外侵袭能力的影响.

方法

将带有绿色荧光蛋白的重组KLF17表达质粒PIRES-EGFP-KLF17转染至SW480细胞中, 以未转染质粒的SW480细胞作为对照, 转染空载质粒的SW480细胞作为阴性对照. 荧光定量PCR和Western blot法检测转染前后KLF17 mRNA和蛋白表达水平. 采用QPCR和Western blot检测转染前后SW480细胞EMT上皮标志物E钙黏素(E-cadherin)和间质标志物波形蛋白(Vimentin)的表达变化. 用Transwell小室实验检测KLF17基因转染对SW480细胞的体外侵袭能力的影响.

结果

KLF17转染48 h后SW480细胞中KLF17 mRNA和蛋白表达水平(2.5087±0.0288; 0.6100±0.05790)均较对照组(1.0000±0.0198; 0.3543±0.0340)明显升高(均P<0.01); 转染KLF17基因后, SW480细胞中E-cadherin mRNA和蛋白的表达量(2.0704±0.0620; 0.5446±0.0245)较对照组均(1.0000±0.0106; 0.3952±0.0430)均显著升高(均P<0.01), Vimentin mRNA和蛋白的表达量(0.4622±0.0279; 0.3290±0.0367)较对照组(1.0000±0.0780; 0.5229±0.0496)均显著降低(均P<0.01); 转染KLF17基因后SW480细胞的体外侵袭能力(86.67个±10.97个)较对照组(145.30个±11.37个)及阴性对照组(135.33个±12.66个)均显著降低(均P<0.01).

结论

KLF17基因可能通过抑制结直肠癌细胞EMT而降低其侵袭能力.

Keywords: KLF17; 结直肠癌; 上皮-间质转化; 侵袭

核心提要:KLF17作为可能的抑癌基因在结直肠癌侵袭转移中的作用及分子机制鲜有报道. 本实验发现初步证实KLF17过表达可能通过抑制上皮间质转化降低结直肠癌细胞的侵袭能力.