研究快报
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世界华人消化杂志. 2016-03-28; 24(9): 1405-1411
Published online 2016-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v24.i9.1405
幽门螺杆菌感染通过核因子κB信号通路调控Fas相关因子1表达的相关机制
陈小妮, 刘爱群, 葛莲英
陈小妮, 刘爱群, 葛莲英, 广西医科大学附属肿瘤医院内镜室 广西壮族自治区南宁市 530021
陈小妮, 在读硕士, 主要从事消化系肿瘤的基础与临床研究.
基金项目: 广西卫生厅重点课题基金资助项目, No. 重2012092; 广西高等学校科研基金资助项目, No. 200710MS013.
作者贡献分布: 此课题由刘爱群与葛莲英共同设计; 实验过程由陈小妮完成; 研究所用试剂及分析工具由刘爱群提供; 论文写作由陈小妮与刘爱群完成.
通讯作者: 刘爱群, 副主任医师, 530021, 广西壮族自治区南宁市河堤路71号, 广西医科大学附属肿瘤医院内镜室. liuaiqun_2004@163.com
电话: 0771-5310521
收稿日期: 2015-12-31
修回日期: 2016-01-19
接受日期: 2016-01-23
在线出版日期: 2016-03-28
Abstract

目的: 探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H. pylori)感染对敲除核因子-κB(nuclear factor-κB, NF-κB)通路上IKKβ、p65基因后过表达Fas相关因子1(Fas-associated factor 1, FAF1)胃癌细胞的影响, 进一步明确H. pylori致癌的相关机制.

方法: 构建针对IKKβ、p65的siRNA慢病毒载体(LV-IKKβ-RNAi、LV-p65-RNAi), 转染过表达FAF1的HGC-27细胞, 实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测转染前后IKKβ、p65、FAF1 mRNA和蛋白表达. 应用CCK8法检测转染后细胞增殖能力的变化. 用H. pylori培养滤液感染基因敲除细胞, 用RT-PCR和Western blot法检测H. pylori感染前后IKKβ、p65、FAF1 mRNA和蛋白表达.

结果: 成功将LV-IKKβ-RNAi、LV-p65-RNAi和阴性对照(LV-NC-RNAi)转染入过表达FAF1胃癌细胞, 转染后72 h, LV-IKKβ-RNAi和LV-p65-RNAi组IKKβ和p65 mRNA和蛋白表达显著低于LV-NC-RNAi组和未转染组(均P<0.01); 转染前后各组间FAF1 mRNA和蛋白表达无显著差异(P>0.05). LV-IKKβ-RNAi组和LV-p65-RNAi组细胞增殖能力升高(P<0.01). H. pylori感染后LV-IKKβ-RNAi组和LV-p65-RNAi组IKKβ、p65 mRNA和蛋白表达与感染前相比无显著差异(P>0.05), 而LV-NC-RNAi组和未转染组IKKβ、p65 mRNA和蛋白表达都显著高于感染前(P<0.01). H. pylori感染后LV-IKKβ-RNAi组和LV-p65-RNAi组FAF1 mRNA和蛋白表达与感染前相比无显著差异(P>0.05), 而LV-NC-RNAi组和未转染组FAF1 mRNA和蛋白表达显著低于感染前(P<0.01).

结论: H. pylori感染可能通过介导NF-κB信号通路下调抑癌因子FAF1的表达, 进而导致胃癌的发生.

Keywords: 幽门螺杆菌; 胃癌; RNA干扰; 核因子-κB; Fas相关因子1

核心提示: 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H. pylori)感染能下调胃癌变过程中Fas相关因子1(Fas-associated factor 1, FAF1)表达, 且FAF1的表达与胃癌的分化程度及浸润转移密切相关, H. pylori感染所引起的凋亡基因调控失衡可能是胃癌变的机制之一. H. pylori感染对FAF1基因调控过程中, 核因子-κB(nuclear factor-κB)信号通路可能在其中发挥了至关重要的作用.