修回日期: 2016-01-14
接受日期: 2016-01-19
在线出版日期: 2016-03-28
目的: 探讨Notch信号节点分子Hes-1以及神经元素3(neurogenin 3, Ngn3)在人脐带间充质干细胞(human umbilicalcord mesenchyreal stem cells, hUMSCs)向胰岛前体细胞分化过程中的表达变化.
方法: (1)分离培养并鉴定hUMSCs; (2)采用联合分阶段诱导法, 取P5代hUMSCs向胰岛前体细胞分化, 倒置相差显微镜观察诱导前后细胞形态变化, 免疫组织化学技术检测诱导后Insulin、Ngn3、胰高血糖素的表达; (3) 诱导后7、14、21 d分别取细胞进行免疫组织化学法、Western blot检测Hes1以及Ngn3的表达变化.
结果: hUMSCs经诱导后, 细胞胞体呈现宽大形态, 并出现胰岛前体细胞的集落, 免疫组织化学技术检测诱导后细胞Ngn3、Insulin、胰高血糖素呈阳性表达; Western blot检测Ngn3在诱导过程中逐渐升高, 诱导14 d(E2组)达到峰值, 21 d(E3组)下降; Hes1的表达7-14 d与空白对照组(CG组)无明显差异, 与21 d(E3组)下降.
结论: 在hUMSCs向胰岛前体细胞诱导过程中Notch信号通路节点分子Hes1表达改变可能参与诱导后细胞进一步分化的调节过程.
核心提示: 糖尿病的生物治疗是近年来糖尿病治疗的热点, 脐带间充质干细胞是其重要的细胞来源. 人脐带间充质干细胞(human umbilicalcord mesenchyreal stem cells, hUMSCs)可分化为具有胰岛细胞分泌功能的胰岛前体细胞, 可作为治疗糖尿病的种子选手. 在hUMSCs向胰岛前体细胞分化过程中, Notch信号通路节点分子Hes1起着至关重要的作用, 其作用机制的明确, 可为干预Notch信号通路来影响干细胞定向分化提供一定的实验资料.