修回日期: 2016-01-18
接受日期: 2016-01-25
在线出版日期: 2016-03-08
目的: 观察健脾补肾、清肠化湿方联合骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells, BMSCs)对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏膜的修复作用.
方法: SD大鼠随机分为空白组、模型组、BMSCs组、干预BMSCs组和联合组. TNBS法建立溃疡性结肠炎大鼠模型, 空白组、模型组大鼠尾静脉分别注射1 mL生理盐水, BMSCs组大鼠尾静脉注射BMSCs, 干预BMSCs和联合组大鼠分别注射体外中药共培养的BMSCs, 联合组再予中药13.6 g/kg灌胃10 d. 分别于第5天和第10天每组各处死5只大鼠, 留取标本. 电子显微镜观察大鼠结肠组织杯状细胞数量, 实时定量PCR检测(real-time quantitative PCR, qRT-PCR)和Western blot法分别检测大鼠结肠组织Muc2 mRNA和蛋白的表达, Western blot法检测Muc2相关因子Math1和KLF-4蛋白的表达.
结果: 与模型组相比, 各治疗组肠黏膜杯状细胞数量增多, 各治疗组Muc2 mRNA水平升高, 联合组优于干预BMSCs组和BMSCs组(P<0.05). 随着时间延长, 治疗效果越明显. 治疗第10天, 与正常组相比, 模型组Muc2、Math1和KLF-4蛋白表达量明显下降, 经治疗后, 各治疗组蛋白表达量均上高, 联合组升高最明显.
结论: 静脉移植BMSCs的同时给予健脾补肾、清肠化湿方能提高黏蛋白Muc2表达水平, 增多杯状细胞数量, 修复肠屏障, 联合灌胃持续给药效果更佳, 其机制可能和提高Math1和KLF-4因子表达有关.
核心提示: 目前认为溃疡性结肠炎发病主要是环境作用于遗传易感者, 在肠道菌群参与下启动了肠道免疫和非免疫系统, 导致免疫炎症反应, 肠黏膜屏障遭到破坏. 骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells, BMSCs)移植治疗已成为研究热点. 本研究初步探索中药联合BMSCs移植从而促进肠黏膜屏障的修复作用及其可能机制.