临床研究
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世界华人消化杂志. 2016-02-28; 24(6): 866-872
Published online 2016-02-28. doi: 10.11569/wcjd.v24.i6.866
miR-409-3b通过下调表皮生长因子蛋白7抑制胃癌侵袭和转移的分子机制
计钰亮, 朱建华, 杨君寅
计钰亮, 朱建华, 杨君寅, 武警浙江省总队嘉兴医院消化内科 浙江省嘉兴市 314000
计钰亮, 住院医师, 主要从事胃癌的研究.
作者贡献分布: 计钰亮负责课题的设计及论文的写作; 朱建华负责研究过程及试剂的提供; 杨君寅负责数据分析.
通讯作者: 计钰亮, 住院医师, 314000, 浙江省嘉兴市南湖区南湖路16号, 武警浙江省总队嘉兴医院消化内科. 3163691422@qq.com
电话: 0753-82852851
收稿日期: 2015-11-30
修回日期: 2015-12-21
接受日期: 2016-01-19
在线出版日期: 2016-02-28
Abstract

目的: 观察miR-409-3b对胃癌细胞侵袭转移的影响, 探讨miR-409-3b通过下调表皮生长因子蛋白7(epidermal growth factor like domain protein 7, EGFL7)调节胃癌侵袭和转移的具体机制.

方法: 通过基因芯片技术筛选出胃癌及癌旁组织差异性表达的微小RNA(microRNA, miRNA); 采用生物学信息学技术预测EGFL7调控相关miRNA, 通过对比上述结果, 筛选出miR-409-3b; 进一步以miR-409-3b慢病毒及miR-409-3b mimics过表达miR-409-3b后, 用Western blot检测胃癌细胞中的EGFL7的表达变化; 采用Transwell侵袭实验及划痕实验检测miR-409-3b慢病毒感染后细胞体外侵袭能力的变化; qRT-PCR检测80例胃癌患者癌组织和癌旁组织中miR-409-3b的表达差异, 并分析miR-409-3b的表达与胃癌患者临床病理之间的关系.

结果: 基因芯片及生物信息学预测发现miR-409-3b在胃癌组织中低表达, 同时又可能调控EGFL7, 双荧光素酶实验证实miR-409-3b可以结合在EGFL7上, miR-409-3b慢病毒及miR-409-3b mimics过表达miR-409-3b都能在蛋白水平下调EGFL7; miR-409-3b家族3条miRNA的qRT-PCR结果表明癌旁组织相对含量高于胃癌组织; Transwell侵袭实验结果表明: miR-409-3b与感染空载慢病毒相比感染能显著降低胃癌细胞穿的能力. 体外划痕实验的结果表明, 经LV-miR-409-3b感染空载慢病毒比BGC-823细胞的迁移能力明显升高. 进一步统计结果表明, miR-409-3b与淋巴结转移有关(P<0.05), miR-409-3b的C/P值在无远处转移的病例组织比具有远处转移的病例组织中明显升高(P<0.05).

结论: miR-409-3b可以在转录后水平调控EGFL7的表达, 从而抑制胃癌细胞的侵袭和转移.

Keywords: 表皮生长因子蛋白7; miR-409-3b; 胃癌; 肿瘤转移

核心提示: 本文观察miR-409-3b对胃癌细胞侵袭转移的影响, 得出miR-409-3b可以在转录后水平下调表皮生长因子蛋白7(epidermal growth factor like domain protein, multiple7)的表达, 从而抑制胃癌细胞的侵袭和转移.