基础研究
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世界华人消化杂志. 2016-02-28; 24(6): 858-865
Published online 2016-02-28. doi: 10.11569/wcjd.v24.i6.858
叶黄素介导Nrf-2/ARE信号途径抑制人结肠癌HT29细胞增殖的作用机制
刘志方, 吴凤秀, 王丽平, 王明臣, 付蕾
刘志方, 吴凤秀, 王丽平, 付蕾, 郑州大学药学院 河南省郑州市 450000
王明臣, 郑州大学基础医学院生物化学教研室 河南省郑州市 450000
基金项目: 河南省医学科技攻关基金资助项目, No. 2011020085.
作者贡献分布: 刘志方与付蕾对此文贡献均等; 此课题由刘志方、付蕾及王明臣设计; 研究过程由刘志方、吴凤秀、王丽平、王明臣及付蕾操作完成; 研究所用试剂及分析工具由刘志方、付蕾及王明臣提供; 数据分析由刘志方完成; 本论文写作由刘志方与付蕾完成.
通讯作者: 王明臣, 教授, 450000, 河南省郑州市高新区科学大道100号, 郑州大学基础医学院生物化学教研室. wangmc@zzu.edu.cn
收稿日期: 2015-12-30
修回日期: 2016-01-11
接受日期: 2016-01-19
在线出版日期: 2016-02-28
Abstract

目的: 研究叶黄素对于核因子相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2, Nrf-2)和血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)表达的影响, 从而研究叶黄素对人结肠癌HT29细胞增殖的抑制作用及其可能的机制.

方法: 用不同浓度的叶黄素(20、40、80、120、160 mg/L)和空白对照组(0 mg/L)处理HT29细胞24、48、72 h, 用CCK8法检测叶黄素对该细胞增殖的抑制作用. 流式细胞仪检测细胞周期. RT-PCR检测Nrf-2和HO-1 RNA表达水平的变化. Western blot检测Nrf-2和HO-1的蛋白表达水平的变化.

结果: 叶黄素能够抑制人结肠癌HT29细胞的增殖, 160 mg/L叶黄素作用72 h后, 抑制率可高达78.09%, 且具有剂量依赖性和时间依赖性. 流式细胞仪检测细胞周期结果显示: 叶黄素作用于HT29细胞48 h后, G0/G1期细胞显著增加. 表明叶黄素可阻滞HT29细胞生长于G0/G1期. RT-PCR检测和Western blot检测的结果共同显示, 经过不同浓度的叶黄素处理后, Nrf-2和HO-1 RNA的表达水平以及蛋白的表达水平与未经叶黄素处理的对照组相比明显上调, 且具有剂量依赖性(P<0.01).

结论: 叶黄素可显著抑制HT29细胞的增殖, 使其细胞周期阻滞在G0/G1期. 同时诱导Nrf-2和HO-1 RNA和蛋白的表达, 这可能是其抑制HT29细胞增殖、发挥保护作用的重要机制.

Keywords: 叶黄素; 结肠癌; 血红素加氧酶-1; 核因子相关因子-2; 增殖抑制; 细胞保护作用

核心提示: 本文探讨人结肠癌细胞(HT29)中叶黄素对Nrf-2/ARE通路的影响. 发现其可以显著抑制HT29细胞的增殖, 使细胞周期阻滞在G0/G1期. 采用RT-PCR和Western blot技术检测Nrf-2和HO-1的表达情况. 结果显示在HT29中叶黄素可诱导Nrf-2和HO-1的表达, 这可能是其抑制细胞增殖的重要机制.