基础研究
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世界华人消化杂志. 2016-12-28; 24(36): 4781-4787
Published online 2016-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v24.i36.4781
miR-29通过调节抗凋亡蛋白Mcl-1表达参与胃癌细胞多药耐药的发生
赵梦雅, 陈虹羽, 刘月, 汪凯, 张晓丹, 张亚飞
赵梦雅, 华中科技大学同济医学院 湖北省武汉市 430030
陈虹羽, 刘月, 中国人民解放军空军总医院消化内科 北京市 100142
汪凯, 张晓丹, 张亚飞, 武汉大学中南医院消化内科 湖北省武汉市 430071
赵梦雅, 在读医学生, 主要从事消化系肿瘤发病机制及诊疗方面的研究.
作者贡献分布: 课题设计由张亚飞完成; 研究过程、数据分析、论文写作由赵梦雅、陈虹羽、刘月、汪凯及张晓丹完成.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81470818; 湖北省自然科学基金资助项目, No. 2015CFC862.
通讯作者: 张亚飞, 副主任医师, 430071, 湖北省武汉市武昌区东湖路169号, 武汉大学中南医院消化内科. zhangyafei1127@163.com
电话: 027-67812888
收稿日期: 2016-10-03
修回日期: 2016-10-28
接受日期: 2016-11-01
在线出版日期: 2016-12-28
Abstract
目的

研究miR-29在胃癌多药耐药细胞株[SGC7901/长春新碱(vincristine, VCR)及SGC7901/阿霉素(adriamycin, ADR)]及其亲本细胞(SGC7901)中的表达差异, 探讨其在胃癌多药耐药发生中的作用及可能机制.

方法

qRT-PCR检测miR-29在不同胃癌细胞系中的表达差异, 通过细胞转染调控miR-29的表达水平, MTT法检测不同化疗药物对转染后胃癌细胞的IC50值变化; 流式细胞术检测细胞凋亡及周期变化; 并应用Western blot、双荧光素酶报告基因实验等方法探讨其可能机制.

结果

SGC7901/VCR及SGC7901/ADR细胞中miR-29家族(miR-29a/b/c)相对表达量均显著低于其亲本细胞SGC7901(P<0.05); MTT实验表明, 下调miR-29表达后SGC7901细胞对不同化疗药物的IC50值显著增高(P<0.05); 而上调miR-29表达后SGC7901/VCR及SGC7901/ADR细胞对不同化疗药物的IC50值则显著降低(P<0.05); 流式细胞术检测结果显示, miR-29表达变化可显著改变5-氟尿嘧啶诱导胃癌细胞的凋亡水平(P<0.05); Western blot、双荧光素酶报告基因实验等证实髓细胞白血病因子-1(myeloid cell leukemia-1, Mcl-1)是miR-29直接调控靶基因.

结论

miR-29表达下调是人胃癌细胞多药耐药发生的机制之一, 其可能与负性调控抗凋亡蛋白Mcl-1表达有关.

Keywords: MiR-29; 胃癌; 多药耐药; 凋亡; 髓细胞白血病因子-1

核心提要: miRNA分子广泛参与肿瘤发生发展过程中基因表达的调控. 在本研究中, 我们以胃癌多药耐药细胞株(SGC7901/长春新碱及SGC7901/阿霉素)为细胞模型, 证实miR-29通过调节抗凋亡蛋白髓细胞白血病因子-1表达参与胃癌多药耐药的发生, 进一步显示miR-29在肿瘤发生发展过程中发挥抑癌基因作用.