基础研究
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世界华人消化杂志. 2016-08-28; 24(24): 3580-3586
Published online 2016-08-28. doi: 10.11569/wcjd.v24.i24.3580
雷公藤甲素对人结肠癌HCT116细胞Bcl-2/Bax和活性Caspase 3表达的影响
赵林, 吴鹏, 章平贵, 谢大泽, 高典, 周南进
赵林, 江西省医学科学院实验中心 江西省南昌市 330006
吴鹏, 章平贵, 谢大泽, 高典, 周南进, 江西省医学科学院分子医学研究所 江西省南昌市 330006
赵林, 高级实验师, 主要从事医学实验方面的研究.
作者贡献分布: 吴鹏与赵林对此文所作贡献均等; 此课题设计、研究过程由周南进、吴鹏、赵林、章平贵、谢大泽及高典完成; 数据分析与本论文写作由吴鹏与周南进完成.
基金项目: 江西省自然科学基金资助项目, No. 20142BAB205079.
通讯作者: 周南进, 研究员, 330006, 江西省南昌市八一大道461号, 江西省医学科学院分子医学研究所. jxznj@163.com
电话: 0791-86362745
收稿日期: 2016-06-24
修回日期: 2016-07-19
接受日期: 2016-08-01
在线出版日期: 2016-08-28
Abstract
目的

研究雷公藤甲素(triptolide, TP)对人结肠癌HCT116细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(B cell lymphoma/leukmia-2 associated X protein, Bax)/B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukmia-2, Bcl-2)和活性Caspase 3表达的影响, 从而研究TP对结肠癌细胞增殖的抑制作用及其可能的机制.

方法

用不同浓度的TP(5、10、20、30、40、80 nmol/L)和空白对照组(0 nmol/L)处理HCT116细胞24、48、72 h, 用MTT法检测TP对结肠癌细胞增殖的抑制作用. 流式细胞仪检测细胞凋亡率, Western blot检测蛋白Bcl-2、Bax和Caspase 3、cleaved Caspase 3蛋白表达水平的变化.

结果

TP可显著抑制HCT116细胞的增殖, 且细胞的存活率随着TP浓度和作用时间的增加而下降, 呈浓度和时间效应. 5、10、20、30、40 nmol/L浓度的TP分别作用HCT116细胞48 h, 细胞凋亡率分别为4.25%、13.6%、34.4%、43.8%、44.5%, 呈剂量依赖关系(P<0.01). 10、20、30、40 nmol/L TP处理T116细胞48h, 随TP浓度的增加, Bcl-2的蛋白水平不断降低, Bax在细胞质的蛋白水平下降, 而在线粒体的蛋白水平升高, 呈剂量依赖关系; Caspase 3的蛋白水平不断降低, 促进cleaved Caspase 3的蛋白水平升高, 呈剂量依赖关系.

结论

TP可显著抑制HCT116细胞的增殖, 可能通过抑制Bcl-2表达水平, 促进cleaved Caspase 3表达水平, 使其诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡抵抗能力减弱.

Keywords: 雷公藤甲素; 结肠癌; 细胞凋亡; Bcl; Bax; 活性Caspase 3

核心提要: 本研究采用流式细胞仪及Western blot检测雷公藤甲素(triptolide, TP)处理后的结肠癌细胞凋亡及Bcl-2和Caspase-3蛋白表达. 提示TP可能是通过调节Bcl-2表达和线粒体内外的Bax表达, 改变Bcl-2/Bax比例, 以及Caspase 3和cleaved Caspase 3蛋白表达, 最终诱导结肠癌细胞凋亡的机制.