基础研究
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世界华人消化杂志. 2016-01-18; 24(2): 187-195
Published online 2016-01-18. doi: 10.11569/wcjd.v24.i2.187
双歧杆菌三联活菌对DSS诱导结肠炎鼠肠紧密连接蛋白JAM-1的影响
张迎娣, 余婷婷, 朱云娟, 赵小静, 程秀琴, 张红杰
张迎娣, 余婷婷, 朱云娟, 赵小静, 程秀琴, 张红杰, 南京医科大学第一附属医院消化内科 江苏省南京市 210029
张迎娣, 在读硕士, 主要从事消化系统炎症性肠病的基础和临床研究.
作者贡献分布: 此课题由张红杰指导与设计; 研究过程由朱云娟、赵小静及程秀琴协助; 张迎娣操作完成; 数据分析由张迎娣与余婷婷完成; 论文撰写由张迎娣完成; 张红杰审阅.
通讯作者: 张红杰, 教授, 210029, 江苏省南京市广州路300号, 南京医科大学第一附属医院消化内科. hjzhang06@163.com
电话: 025-68136973
收稿日期: 2015-11-01
修回日期: 2015-11-26
接受日期: 2015-11-30
在线出版日期: 2016-01-18
Abstract

目的: 探讨双歧杆菌三联活菌对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium, DSS)诱导的结肠炎小鼠肠道炎症及紧密连接蛋白连接黏附分子1(junctional adhesion molecule-1, JAM-1)表达与分布的影响.

方法: 将SPF级♀Balb/c小鼠(8-10周龄)随机分为5组: 正常对照NC组、益生菌BB组(正常小鼠予益生菌灌胃14 d)、急性DSS模型组(生理盐水灌胃14 d+第8天起4%DSS溶液自由饮用7 d)、BD组(益生菌灌胃7 d +第8天起4%DSS溶液自由饮用7 d)、BDB组(益生菌灌胃14 d+第8天起4%DSS溶液自由饮用7 d). 记录小鼠每日体质量变化. 第15天处死小鼠、分离结肠, 观察各组肠道损伤情况, 以组织病理学积分评估结肠炎的严重程度. 采用Western blot法、免疫组织化学法(IHC)检测结肠组织中JAM-1的表达及分布.

结果: 与DSS模型组相比, 益生菌干预组(BD、BDB组)小鼠减轻的体质量得到不同程度恢复(95.17%±3.34%、87.17%±1.83% vs 81.49%±2.16%, P1<0.01, P2 = 0.08), 病变结肠缩短程度、肠黏膜水肿, 上皮细胞破坏程度及肠道炎症细胞浸润减轻, 且BD组小鼠的改善程度优于BDB组. Western blot结果显示给予益生菌干预, BD、BDB组肠黏膜组织JAM-1蛋白的表达水平较DSS组显著增加(0.725±0.027、0.739±0.033 vs 0.454±0.073, 均P<0.05). 免疫组织化学结果显示DSS模型组小鼠结肠黏膜JAM-1染色强度明显减弱, 染色细胞数减少, 分布散乱、中断, 益生菌处理后JAM-1染色强度及阳性细胞数减少程度显著改善. 仅给予益生菌灌胃的小鼠, 体质量、结肠大体、镜下表现以及结肠组织中JAM-1蛋白表达水平及分布, 与正常小鼠无显著差异(P>0.05).

结论: 双歧杆菌三联活菌可能通过影响JAM-1蛋白的表达与分布, 改善肠黏膜的屏障功能, 从而减轻小鼠急性期肠道炎症反应.

Keywords: 双歧杆菌三联活菌; 葡聚糖硫酸钠; 结肠炎; 紧密连接蛋白; 连接黏附分子1

核心提示: 本研究应用双歧杆菌三联活菌作用于葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium)诱导的结肠炎小鼠, 结果表明双歧杆菌三联活菌能减轻小鼠急性期肠道炎症反应, 可能与影响连接黏附分子1(junctional adhesion molecule-1)蛋白的表达与分布, 进而改善黏膜的屏障功能有关.