研究快报
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世界华人消化杂志. 2016-06-28; 24(18): 2862-2868
Published online 2016-06-28. doi: 10.11569/wcjd.v24.i18.2862
蟾毒灵调控TGFβ1/smad信号通路对胃癌MGC803细胞增殖的影响作用
王师英, 林江, 邢立凯, 陈腾
王师英, 邢立凯, 陈腾, 上海中医药大学附属普陀医院普外科 上海市 200062
王师英, 林江, 上海中医药大学附属龙华医院消化科 上海市 200032
王师英, 主要从事胃肠肿瘤防治研究.
作者贡献分布: 此课题由王师英与陈腾设计; MTT、蛋白质印迹和ELISA检测分析由王师英、邢立凯及林江操作完成; 试剂的准备由邢立凯完成; 数据统计与论文写作由王师英完成.
基金项目: 上海市教委创新基金资助项目, No. 13ZZ095.
通讯作者: 陈腾, 主任医师, 博士生导师, 200062, 上海市兰溪路164号, 上海中医药大学附属普陀医院普外科. tengchen8076@163.com
电话: 021-22233189
收稿日期: 2016-04-17
修回日期: 2016-05-20
接受日期: 2016-05-31
在线出版日期: 2016-06-28
Abstract

目的: 探讨蟾毒灵对人胃癌MGC803细胞生长增殖的影响, 并探索其可能的作用机制.

方法: 用蟾毒灵溶液干预胃癌MGC803细胞. 采用MTT法与台盼蓝染色实验测蟾毒灵溶液作用对胃癌MGC803细胞生长增殖影响; ELISA法检测MGC803细胞培养基中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)蛋白的含量; 蛋白质印迹法检测蟾毒灵干预后MGC803细胞中P-smad3、smad4、cyclin D1信号通路相关蛋白表达的变化.

结果: MTT检测显示: 低、中、高剂量的蟾毒灵组MGC803细胞的活力均发生明显一直, 且各剂量组间细胞活力存在明显差异(F = 13.216, P = 0.002); 同时台盼蓝染色计数结果也发现: 低、中、高剂量蟾毒灵组MGC803细胞的死亡率也随药物浓度的过高而升高, 其中中、高剂量组MGC803细胞死亡率较对照组上升明显(χ2 = 9.667, P = 0.022); 同时, 与对照组相比, 低、中、高剂量蟾毒灵组MGC803细胞上清液中TGF-β1的含量明显的下降, 组间数据比较具有明显统计差异(F = 36.455, P<0.001); 蛋白质印迹检测显示, 蟾毒灵干预后, MGC803细胞中P-smad3、cyclin D1蛋白水平明显下降, 并且随着蟾毒灵的剂量的增加, 抑制作用明显增强(P<0.05); 而同时smad4蛋白的表达水平呈现明显上调, 且亦与蟾毒灵剂量存在明显的量效关系(P<0.001).

结论: 蟾毒灵可抑制胃癌MGC803细胞的增殖, 并且其作用的发挥可能与蟾毒灵对TGFβ1/smad信号通路的调控作用有关.

Keywords: 胃癌; 蟾毒灵; 增殖; TGFβ1/smad信号通路

核心提示: 本实验从细胞实验角度, 研究蟾毒灵对胃癌MGC803细胞的作用, 发现其可明显抑制胃癌细胞MGC803的生长增殖, 且发现其作用机制可能与其通过阻滞TGFβ1/smad信号通路的信号传导, 阻滞MGC803细胞的细胞增殖周期有关.