Published online 2016-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v24.i12.1806
修回日期: 2016-03-15
接受日期: 2016-03-23
在线出版日期: 2016-04-28
目的: 检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)对体外培养的原代大鼠肝内胆管上皮细胞Jagged-1表达的影响以及诱导其间质-上皮转化的作用.
方法: 原代胆管上皮细胞分为对照组, TNF-α处理组(10 ng/mL), TNF-α加核转录因子-κB(nuclear factor kappa B, NF-κB)抑制剂PDTC(pyrrolidine dithiocarbamate)(50 μmol/L)处理组及PDTC单独处理组, 72 h后Western blot法检测各组细胞Jagged-1蛋白、间质细胞标记成纤维细胞特异性蛋白-1(fibroblast specific protein 1, FSP-1)、波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α smooth muscle actin, α-SMA)和胆管细胞特异性标记角蛋白19片段(cytokeratin 19, CK19)的蛋白的表达, 凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)检测NF-κB蛋白结合活性. 倒置显微镜观察各组胆管细胞的形态变化, Transwell小室法检测细胞的迁移能力.
结果: TNF-α处理组胆管上皮细胞NF-κB的活性增强, Jagged-1、FSP-1、Vimentin和α-SMA蛋白的表达水平上调, CK19的表达下调, 细胞迁移能力增强, 细胞形态由鹅卵石样向梭形样转化. TNF-α+PDTC与TNF-α组相比其NF-κB活性明显减弱, Jagged-1, FSP-1, Vimentin和α-SMA蛋白水平降低, CK19表达升高, 细胞迁移能力减弱, 细胞形态向鹅卵石样转化.
结论: TNF-α可通过激活NF-κB信号上调Jagged-1蛋白表达的同时诱导大鼠胆管上皮细胞向间质细胞转化.
核心提示: 本文检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)对体外培养的原代大鼠肝内胆管上皮细胞Jagged-1表达及诱导其间质-上皮转化作用的影响, 结果证实, TNF-α可能通过激活Notch通路而促进胆管上皮细胞发生上皮-间质转化.