基础研究
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世界华人消化杂志. 2016-04-28; 24(12): 1806-1811
Published online 2016-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v24.i12.1806
TNF-α激活大鼠胆管上皮细胞Jagged-1的表达并诱导其上皮-间质转化
李潼, 郭兵, 高杨, 于奇宏, 李锦锦, 鲜文静, 蒋帅, 郑启昌, 张勇
李潼, 郭兵, 高杨, 于奇宏, 李锦锦, 蒋帅, 郑启昌, 张勇, 华中科技大学同济医学院附属协和医院肝胆外科 湖北省武汉市 430030
鲜文静, 华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科 湖北省武汉市 430030
李潼, 在读博士, 主要从事消化系统疾病的研究.
基金项目: 国家自然科学基金面上项目, No. 81570566; 2015年度湖北省留学人员科技活动项目择优资助经费.
作者贡献分布: 李潼与郭兵对此文所作贡献均等; 此课题由张勇设计; 研究过程由李潼、郭兵、高杨、于奇宏、李锦锦、鲜文静、蒋帅、郑启昌及张勇共同完成; 论文写作由李潼、郭兵及张勇共同完成.
通讯作者: 张勇, 副教授, 副主任医师, 430030, 湖北省武汉市硚口区解放大道1277号, 华中科技大学同济医学院附属协和医院肝胆外科. zhangyongtjmc@126.com
电话: 027-85351623
收稿日期: 2016-02-15
修回日期: 2016-03-15
接受日期: 2016-03-23
在线出版日期: 2016-04-28
Abstract

目的: 检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)对体外培养的原代大鼠肝内胆管上皮细胞Jagged-1表达的影响以及诱导其间质-上皮转化的作用.

方法: 原代胆管上皮细胞分为对照组, TNF-α处理组(10 ng/mL), TNF-α加核转录因子-κB(nuclear factor kappa B, NF-κB)抑制剂PDTC(pyrrolidine dithiocarbamate)(50 μmol/L)处理组及PDTC单独处理组, 72 h后Western blot法检测各组细胞Jagged-1蛋白、间质细胞标记成纤维细胞特异性蛋白-1(fibroblast specific protein 1, FSP-1)、波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α smooth muscle actin, α-SMA)和胆管细胞特异性标记角蛋白19片段(cytokeratin 19, CK19)的蛋白的表达, 凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)检测NF-κB蛋白结合活性. 倒置显微镜观察各组胆管细胞的形态变化, Transwell小室法检测细胞的迁移能力.

结果: TNF-α处理组胆管上皮细胞NF-κB的活性增强, Jagged-1、FSP-1、Vimentin和α-SMA蛋白的表达水平上调, CK19的表达下调, 细胞迁移能力增强, 细胞形态由鹅卵石样向梭形样转化. TNF-α+PDTC与TNF-α组相比其NF-κB活性明显减弱, Jagged-1, FSP-1, Vimentin和α-SMA蛋白水平降低, CK19表达升高, 细胞迁移能力减弱, 细胞形态向鹅卵石样转化.

结论: TNF-α可通过激活NF-κB信号上调Jagged-1蛋白表达的同时诱导大鼠胆管上皮细胞向间质细胞转化.

Keywords: 肿瘤坏死因子-α; 胆管上皮细胞; 上皮-间质转化

核心提示: 本文检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)对体外培养的原代大鼠肝内胆管上皮细胞Jagged-1表达及诱导其间质-上皮转化作用的影响, 结果证实, TNF-α可能通过激活Notch通路而促进胆管上皮细胞发生上皮-间质转化.