Published online 2016-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v24.i12.1797
修回日期: 2016-03-28
接受日期: 2016-04-06
在线出版日期: 2016-04-28
目的: 通过观察肝再生磷酸酶3(phosphatase of regenerating liver 3, PRL-3)对胃癌SGC7901细胞迁移侵袭及RhoC表达的影响,探讨胃癌SGC7901细胞迁移侵袭的机制中PRL-3和RhoC是否位于同一信号通路.
方法: 体外培养人胃癌SGC7901细胞, 经不同浓度PRL-3抗体(1:600, 1:400, 1:200)作用后, 采用细胞划痕实验观察不同时间段(0、12、24、48 h)SGC7901细胞的迁移距离; 通过Transwell迁移侵袭实验检测不同浓度PRL-3抗体(1:600, 1:400, 1:200)作用48 h后SGC7901细胞迁移侵袭的穿膜细胞数, 并采用Real-time PCR和ELISA检测SGC7901细胞中RhoC mRNA及蛋白表达量的变化, 比较不同浓度PRL-3抗体处理后SGC7901细胞迁移侵袭的细胞数和RhoC mRNA及蛋白的表达量.
结果: 与对照组比较, 随着PRL-3抗体浓度的升高和作用时间的延长, SGC7901细胞的迁移距离逐渐减小, 在48 h, 经不同浓度PRL-3抗体(1:600, 1:400, 1:200)处理SGC7901细胞后, 其迁移和侵袭的细胞数, RhoC mRNA相对表达量和蛋白表达水平与对照组相比均明显降低(迁移SGC7901细胞数: 365.0±5.0, 165.3±5.0, 90.3±5.5 vs 512.3±4.9; 侵袭SGC7901细胞数: 321.3±6.1, 179.0±6.1, 75.7±4.0 vs 545.3±5.0; RhoC mRNA的相对表达量: 0.910±0.022, 0.742±0.018, 0.539±0.015 vs 1.000±0.000; RhoC蛋白表达量: 1130.77 g/mL±15.32 g/mL, 981.52 g/mL±14.44 g/mL, 893.03 g/mL±11.10 g/mL vs 1212.42 g/mL±18.37g/mL)(均P<0.01), 不同PRL-3抗体浓度组两两比较均有统计学意义(均P<0.01).
结论: PRL-3在体外能显著促进SGC7901细胞的迁移侵袭, 并能增强RhoC基因和蛋白的表达, 提示在SGC7901细胞迁移侵袭的机制中PRL-3和RhoC可能位于同一信号通路.
核心提示: 肝再生磷酸酶3(phosphatase of regenerating liver 3, PRL-3)不仅能促进SGC7901细胞迁移侵袭, 也具有降低其细胞内RhoC基因和蛋白的作用, 但以上两种作用并非具有直接的因果关系, PRL-3可能通过某种信号通路影响RhoC基因和蛋白的表达, 间接说明PRL-3和RhoC可能位于同一条信号通路.